课件基因工程的基本下操作程序.pptVIP

第二节 基因工程的原理和技术 一、目的基因的获取（获得人的胰岛素基因） 营养缺陷性筛选法： 载体分子携带营养成分（氨基酸，核苷酸）的生物合成基因，受体细胞基因突变，不能合成营养物质。两者构成营养缺陷。 在缺少营养物质的培养基上受体细胞不存活，存活的是导入成功的受体细胞。 * 问题： 如何使大肠杆菌生产出人的胰岛素？ 1 获得人的胰岛素基因 ——目的基因的获取① 将目的基因转移入大肠杆菌 （1）将人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒中 ——形成重组DNA分子② （2）将重组质粒导入到大肠杆菌中？ ——将重组DNA分子导入受体细胞③ （3）人的胰岛素基因导入成功了吗？ ——筛选含有目的基因的受体细胞④ 大肠杆菌能合成人的胰岛素 ——目的基因的表达⑤ 获取 重组 导入 检测 表达 DNA的粗提取 1、从基因文库中获取目的基因： (通常在未知DNA序列的情况下) 基因组文库的构建： cDNA文库的建立： 基因文库 ： 基因组文库：包含该生物的所有基因。 cDNA文库：包含该生物