《植物生物技术浩概论》2.pptVIP

反应初期，目的DNA片段呈指数形式增加；随着目的DNA的积累，在引物、模板与DNA聚合酶达到一定比例时，酶的催化反应趋于饱和平台期（25个循环）。 * 园艺植物生物工程研究所 1. 双链DNA变性 * （一）PCR的反应过程 园艺植物生物工程研究所 * 2. 引物与模板DNA退火 园艺植物生物工程研究所 * 3.引物延伸 DNA合成 园艺植物生物工程研究所 * 4.第二轮循环的变性 园艺植物生物工程研究所 * 5.第二轮循环的引物延伸 DNA合成 园艺植物生物工程研究所 * 园艺植物生物工程研究所 * PCR反应的特点 特异性强 灵敏度高：PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(mg=10-6)水平 简便、快速：PCR反应一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。 园艺植物生物工程研究所 * （二）RT-PCR（reverse transcription PCR） 反转录PCR是一种从RNA扩增cDNA的方法。 提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA；再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检