核酸与蛋白质的生因物合成.ppt

第十一章 核酸与蛋白质的生物合成Biosynthesis of Nucleic Acid and Protein DNA的复制与修复 DNA的复制 DNA的修复 DNA的反转录 RNA的转录与加工 RNA的转录 RNA的加工 蛋白质的生物合成 蛋白质合成的分子基础 蛋白质的翻译 中心法则 DNA是由四种脱氧核糖核酸所组成的长链大分子，是遗传信息的携带者。生物体的遗传信息就贮存在DNA的四种脱氧核糖核酸的排列顺序中。 中心法则：DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代；通过转录和翻译，将遗传信息传递给mRNA，再传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。 反中心法则 在RNA病毒中，其遗传信息贮存在RNA分子中。因此，在这些生物体中，遗传信息的流向是RNA通过复制，将遗传信息由亲代传递给子代，通过反转录将遗传信息传递给DNA，再由DNA通过转录和翻译传递给蛋白质，这种遗传信息的流向就称为反中心法则。 第一节 DNA的复制与修复一、DNA复制的特点1、半保留复制 DNA在复制时，以亲代DNA的每一股作模板，合成完全相同的两个双链子代DNA，每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链，这种现象称为DNA的半保留复制(semi-conservative replication)。 2、有一定的复制起点origin DNA在复制时，需在特定的位点起始，这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段，即复制起始点（复制子）。在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。 3、需要引物primer 参与DNA复制的DNA聚合酶，必须以一段具有3’端自由羟基（3’-OH）的RNA作为引物，才能开始聚合子代DNA链。 RNA引物的大小，在原核生物中通常为50～100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物的碱基顺序，与其模板DNA的碱基顺序相配对。 4、双向复制与复制叉 DNA复制时，以复制起始点为中心，向两个方向进行复制。但在低等生物中，也可进行单向复制（如滚环复制）。 DNA复制时，局部双链解开形成两条单链，这种叉状结构称为复制叉。 5、半不连续复制 由于DNA聚合酶只能以5’→3’方向聚合子代DNA链，即模板DNA链的方向必须为3’→5’。因此，分别以两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的。 以3‘→5’方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5‘→3’，这一条链被称为前导链(leading strand)。而以5‘→3’方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的，其链的聚合方向也是5‘→3’，这条链被称为后随链(lagging strand)。 由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的，因此后随链的合成也是一段一段的。DNA在复制时，由后随链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段。冈崎片段的大小，在原核生物中约为1000～2000个核苷酸，而在真核生物中约为200个核苷酸。 二、参与DNA复制的分子1、底物 以四种脱氧核糖核酸(deoxynucleotide triphosphate)为底物，即dATP，dGTP，dCTP，dTTP。 2、模板template DNA复制是模板依赖性的，必须要以亲代DNA链作为模板。亲代DNA的两股链解开后，可分别作为模板进行复制。 3、RNA引物 primer 在DNA复制中需要许多个RNA引物，它们由引发体合成。 引发体(primosome)由引发前体与引物酶（primase）组装而成。 引发前体是由若干蛋白因子聚合而成的复合体。在原核生物中，引发前体至少由六种蛋白因子构成。分别与引物的预合成和复制起始点识别有关。 引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶，该酶以DNA为模板，合成一段RNA短链引物(primer)，以提供自由的3-OH，使子代DNA链能够开始聚合。 4、DNA聚合酶polymerase1） DNA聚合酶的种类和生理功能 DNA聚合酶催化DNA链的延伸，即DNA聚合反应。 在原核生物如大肠杆菌中，目前发现的DNA聚合酶有三种，分别命名为DNA聚合酶Ⅰ(polⅠ)、DNA聚合酶Ⅱ(polⅡ)、DNA聚合酶Ⅲ(polⅢ)，这三种酶都具有多种酶活性。参与DNA复制的主要是polⅢ和polⅠ。 polI为单一肽链的大分子蛋白质,可被特异的蛋白酶水解为两个片段，大片段称为Klenow片段，具有5‘→3’聚合酶活性和3‘→5’外切酶的活性，小片段具有5‘→3’外切酶活性。 polⅢ由十种亚基组成，其中α亚基具有5→3聚合酶活性，因而具有复制DNA的功能；而ε亚基具有3→5外切酶的活性，因而与DNA