Q_khst010-2017PHA加工工艺.pdf

扬州科汇生态工程技术有限公司企业标准 PHA 复合菌剂生产工艺流程与设计（附简图) 1 一．生产前的准备工作 （1）生产用菌种的鉴定:主要包括纯度鉴定，生产性能的检查， 有无杂菌污染。还有就是菌种的活性，重要特性有无退化等。 （2 ）如菌种已发生功能性改变或被杂菌污染，还需要进行菌种 的纯化或或复壮。 （3 ）其次在规模生产之前，还要通过实验室中试，确定该菌群 的最适生长温度，PH ，发酵培养基的最适成分与比例；生长曲 线的绘制与最适培养时间的确定。我们一般选取对数生长期的菌 体（丝）做为生产发酵用的菌种。最佳接种量与装液量的控制。 二．实验室菌种的活化与种子培养阶段： （1）将冷冻保藏管中的菌种在斜面中活化（37℃ 24h），并在平板 中进行纯化（37℃ 24h）。最终得到斜面菌种或菌种斜面。 斜面培养 葡萄 牛肉膏 蛋白胨 Nacl 琼脂 PH 基成份 糖 组成比例 0.1% 1% 1% 0.5% 2.0-2.5% 7.0-7.2 （2）摇瓶培养阶段: 取一环纯化后的的菌种，接入装量为20mL 种子 培养基的250mL三角瓶中，置于180r/min 中摇床中培养 (37℃ 18h)。 分别取 1mL 的种子液 ,接入五个盛有 20mL 发酵培养基的250 mL 三 角瓶中。置于 180 r/ min 摇床中 培养（37℃ 24h） 。接种量为三 角瓶实际培养基装量的4-5%.PH 控制在7.0-7.5 之间。 2 培养基组成见下表： 摇瓶种子 磷酸 葡萄 尿 硫酸 硫酸 硫酸 培养基成 氢二 玉米浆 PH 糖 素 镁 亚铁 锰 分 钾 各组成成 2.5 0.5 0.04 0.1 2.5-3.5 2ppm 2ppm 7.0 分比例 （%） （注；1ppm=1mg/l) 三．生产车间多级种子罐发酵阶段： 工艺流程 工艺条件 中控 121℃~125 ℃ 蒸汽 全部设备灭菌 0.103MPa~0.168 MPa 0.5h~1.0h 种子罐 一级种子罐 培养基 加料体积50%~75%，实际为60% 配料 一级种子罐 PH6.5~7.5 PH 值检测 精密试纸或PH 计 121℃~125 ℃ 蒸汽 一级种子罐灭 0.103MPa~0.168 MPa 菌 0.5h~1.0h 灭菌空气 一级种子罐降 25 ℃~35 ℃ 温 常压 3 摇瓶菌种 一级种子罐接 物料量的0.5-5%.实际接