核酸的生到物合成.pptVIP

§2 Biosynthesis of RNA 一、转录（Transcription） 概念：DNA的遗传信息转移到RNA分子中的过程，即通过酶促合成与基因编码链碱基序列相同的RNA链，转录产物有3种RNA：mRNA, rRNA, tRNA。 不对称转录 在生物体内，DNA的两条链中只有一条用于转录，另一条链可能对转录起调节作用。 用于转录的链为模板链（template strand）/负链/反义链/非编码链； 另一条链称为非模板链/正链/有义链/编码链。 由于转录只在DNA的一条链进行，所以称为不对称转录。 转录的起始点 是指mRNA开始转录的第一个碱基，此点常用+1表示。 启动子：RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。在RNA转录起点的上游，约100~200 bp。 (一) RNA合成的酶促反应 新合成链的5’ 端常是GTP或ATP，它们的5’ –三磷酸基团在转录过程中保留完整。 转录时，DNA双链只部分解链，新RNA链与模板链形成RNA-DNA杂交链。 （二）原核生物RNA的合成 E.coli RNA polymerase σ因子转录开始时识别转录起始点，使全酶结合在起始位点上，形成全酶-DNA复合物, 而在转录合成开始后被释放，由核心酶催化RNA的合成。 转录过程 终止 转录终止需要终止信号，即转录终止子（terminators ）的DNA序列。 两类终止子： ρ -非依赖性终止子 ρ-依赖性终止子 ρ-依赖性终止子 有的终止子要?因子的帮助才能终止转录。其回文结构不富含G-C区，其后无寡聚U。细菌中少见，噬菌体中广泛存在。 （三）真核生物转录作用 （四） 转录过程的选择性抑制剂 按照作用的对象、性质不同，分为2种： 一、模板功能的抑制剂 嵌合剂： 如放线菌素D (p 266)嵌入dG-dC之间 溴乙锭EB为高灵敏度荧光试剂 吖啶 二、RNA聚合酶的抑制剂 原核生物：利福霉素（衍生物：利福平） 真核生物：?-鹅膏蕈碱 （五）转录后加工 (post-transcriptional processing) 定义：各种RNA合成时，先以DNA为模板生成分子量较大的RNA前体（primary transcript），然后在专一酶的作用下切除多余的部分，或进行修饰，最后才生成有活性的“成熟”RNA。 1. rRNA前体的转录后加工 （1） 原核生物rRNA前体的加工 30S→16S、23S、5S、 tRNA （2）真核生物rRNA前体的加工 45S→5.8S、18S、28S （5S rRNA由其它途径产生 ） 2. tRNA前体的加工 细胞内tRNA种类多，各种tRNA加工方式不同，但主要方式有以下几种： 除去前体5’和3’端多余的核苷酸 （ 有时tRNA分子酶解产生2个或更多的tRNA） 3’末端加上CCA 碱基的修饰：甲基化、脱氨和还原作用 3.真核mRNA前体的加工  CP：hnRNA and mature mRNA？ 3’端加polyA RNA 剪接4种类型 类型Ⅰ自我剪接（group Ⅰ self-splicing） 类型Ⅱ自我剪接（group Ⅱ self-splicing） 核mRNA剪接体的剪接（nuclear mRNA splicesomal splicing） 核tRNA的酶促剪接（nuclear tRNA enzymatic splicing） 二、RNA的复制 以RNA携带遗传信息，并能通过RNA复制与自身相同RNA分子的生物，如 RNA复制类型 以病毒RNA直接作为复制的模板； 以病毒RNA为模板逆转录出cDNA，然后再从DNA转录出病毒RNA。 三、逆转录（reverse transcription ）  ——RNA指导的DNA合成 1970年， Temin、Mizufani、Baltimore同时分别从致癌RNA病毒中发现RNA指导的DNA聚合酶——逆转录酶(reversetranscriptase)，有利地证明了Temin 于1964年提出的前病毒学说 (previrus theory)。 （1975年获Nobel Prize） 前病毒学说：致癌