核酸与蛋白质的生物敏合成讲义.docVIP

DNA的生物合成 复制（replication）：以DNA为模板，合成两个完全相同的双链子代DNA的过程。 转录（transcription）：在DNA分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程。 翻译（translation）：在RNA控制下，根据核酸链上每三个核苷酸决定一个AA的三联体密码规则，合成出具有特定顺序的蛋白肽链过程。 遗传学的中心法则： DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代； 通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。 在RNA病毒中，其遗传信息贮存在RNA分子中。它们的遗传信息的流向是RNA通过复制，将遗传信息由亲代传递给子代； 通过反转录将遗传信息传递给DNA，再由DNA通过转录和翻译传递给蛋白质，这种遗传信息的流向就称为反中心法则。 第一节 DNA复制的特点 一、半保留复制 407 1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 证明DNA的半保留复制。 半保留复制: 以DNA为模板，合成两个完全相同的双链子代DNA的过程。其中,每个子代分子的一条链来自于亲代DNA,另一条链为新合成的 二、有复制起始点 复制子（replicon)：基因组能独立进行复制的单位。含有控制复制起始的起点，也可能含有一个复制终点。 起始位点（原点origin）：具有特定核苷酸排列顺序的片段 原核生物的复制子通常为一个； 真核生物则为多个复制子。 三、复制方向 多数：双向复制 低等生物：单向复制（滚环复制） 四、需要RNA引物 DNA聚合酶以一段具有3’端自由羟基（3’-OH）的RNA作为引物(primer) ，聚合子代DNA链。 RNA引物的大小: 原核生物通常为50～100个核苷酸，真核生物约为10个核苷酸。 RNA引物的碱基顺序，与模板DNA的碱基顺序相配对。 五、半不连续复制 418 DNA聚合酶只能以5‘→3’方向聚合子代DNA链，即模板DNA链的方向必须为3‘→5’。 因此，分别以两条反平行的DNA链作为模板聚合子代DNA时的方式是不同的。 以3‘→5’方向的亲代DNA链作模板时，子代链的聚合方向为5‘→3’, 复制是连续进行的，该链称为领头链(leading strand)。 亲代DNA双链复制时是逐步解开的，以5‘→3’方向的亲代DNA链为模板时, 子链的合成是不连续的，该链称为随从链(lagging strand)。 复制时，由随从链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki fragment)。 冈崎片段的大小 原核生物中约为1000～2000 bp (base pair)， 真核生物约为100 bp。 六 、DNA复制的酶学 410 (一)、拓扑异构酶(topoisomerase) 419 生物体内的DNA分子常处于负超螺旋态（三级结构）。复制前，需改变DNA分子拓扑构象，避免DNA分子打结、缠绕、连环。 1、拓扑异构酶Ⅰ 最初是从大肠杆菌中分离到的w-蛋白； 先将双链中的一条链切断，松开双螺旋后再将DNA链连接起来，从而避免出现链的缠绕。 反应不需ATP供能 2、拓扑异构酶Ⅱ 又称DNA旋转酶（DNA gyrase)， 可切断DNA双链，使DNA的超螺旋松解后，再将其连接起来。 需ATP供能。 （二）解螺旋酶helicase：421 大肠杆菌中发现的解螺旋酶为DnaB。 可以将DNA双链解开成为单链。 每解开一对碱基，需消耗两分子ATP。 （三）、单链DNA结合蛋白 421 single strand binding protein, SSB，又称螺旋去稳蛋白（HDP），为与单链DNA结合的蛋白质因子 作用：① 稳定DNA解开的单链；②阻止复性、保护单链DNA，避免核酸酶的降解。 （四）引物酶primase： 一种RNA聚合酶，在复制起点处以DNA为模板，催化合成一小段互补的RNA。 引物酶能直接在单链DNA模板上催化游离的NTP合成一小段RNA。 作用：提供3’-OH， 以用于DNA聚合酶催化链的延伸。 （五）DNA聚合酶 410 1、DNA聚合酶的反应特点 （1）、底物：dNTP, N=A,T,C,G （2）、模板：DNA （3）、引物： 提供3￠-OH末端 （4）、子链的延伸方向：5`?3`： 2、DNA聚合酶的活性： 5?￠3￠ 的聚合活性 5?￠3￠核酸外切酶活性 3?￠5￠核酸外切酶活性 复制 复制 修复 切除引物、修复 功能 20 40 400 分子数/细胞 10 1 1 亚基数 - - + 5?? ??外