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常州二平中《基因工程》-1
二轮复习 常州市第二中学高三生物备课组
PAGE
PAGE 15
专题一 基因工程
一、考点盘点
内容
等级要求
(1)基因工程的诞生
A
(2)基因工程的原理及技术
A
(3)基因工程的应用
B
(4)蛋白质工程
A
二、知识网络
1.1 DNA重组技术的基本工具
1.2 基因工程的基本操作程序
1.3 基因工程的应用
1.4 蛋白质工程的崛起
三、基础回顾及能力拓展
1、基因工程的原理
问题1:利用基因工程技术,能否对生物的性状进行定向改造?
这种技术应用了哪种可遗传变异原理?
问题2:基因工程能对不同种生物的DNA进行操作的原因是 。
2、DNA重组的基本工具
问题1:限制性核酸内切酶的特点是什么 。
右表限制酶SmaI和限制酶XmaI作用的相同点是 ,不同点是 。
问题2:
甲处是 键,乙处是 键。
DNA连接酶作用于 (甲、乙)处。
DNA聚合酶作用于 (甲、乙)处。
解旋酶作用于 (甲、乙)处。
纠错笔记:
项目
种类
作用底物
作用部位
作用结果
限制酶
DNA分子
磷酸二酯键
形成粘性末端或平末端
DNA连接酶
DNA分子片段
磷酸二酯键
形成重组DNA分子
DNA聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二酯键
形成新的DNA分子
DNA(水解)酶
DNA分子
磷酸二酯键
形成脱氧核苷酸
DNA解旋酶
DNA分子
碱基对间的氢键
形成单链DNA分子
问题3:在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制
酶切位点。 已知EcoR = 1 \* ROMAN I限制酶的识别序列为 ,切割位点在G与A之间。
怎样把左图中的酶切位点改造成 ?
构建需要的限制酶切位点的过程:
①首先用 酶处理质粒;②然后用DNA聚合酶等处理质粒;
③再运用 酶处理质粒,从而形成新的限制酶切位点。
3、DNA基因工程的基本操作程序
问题1:怎样获取目的基因?
目的基因的获取方法
目的基因的获取方法
问题2:
PCR流程图引物1引物2
PCR流程图
引物1
引物2
需用 酶,该酶有何特点?
所需的引物是否碱基互补配对?
在第 轮循环产物中开始出现两条
脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
问题3:下图表示某基因工程中基因表达载体的构建,其中酶1、酶2、酶3、酶4表示四种限制酶,酶1的识别序列和切割位点是:G↓AATTC,酶2的识别序列和切割位点是:AG↓CT,酶3的识别序列和切割位点是:CCC↓GGG,酶4的识别序列和切割位点是:CTGCA↓G。
(1)A端用酶 切割,B端用酶 切割,C端用酶 切割,D端用酶 切割。
(2) 端和 端的粘性末端是一样的。
(3)在重组质粒中,AC连接部分能否被酶1识别并切割?
(4)在重组质粒中,BD连接部分能否被酶2识别并切割?
能否被酶3识别并切割?
(5)两段DNA片段能够拼接的结构基础
除此之外,黏性末端只有 ,端口才能遵循碱基互补原则被DNA连接酶缝合;
而平末端则没有这个要求。
问题4:基因工程中基因表达载体除需具有目的基因外,还有复制原点、 、
、标记基因。如利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素时,需要在生长激素编码序列前插入 的启动子。且由生长激素基因表达产物无法推知启动子碱基序列,原因是
研究还发现复制原点处的碱基序列特点通常含A、T碱基较多,其意义是 。
问题5:将目的基因导入植物细胞,最常用的方法
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