基于电化学检测技术的DNA分子逻辑门的构建及其应用研究-分析化学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 川Y 川Y 3 jjii●I 川0 Ⅲ9 ⅢⅢⅢ●I ㈣9 ㈣4 摘要 著名的((Nature Biotechnology杂志曾在2000年评论说“电化学DNA分析时代到来了”。电化 学方法不仅简便、快速、低耗，灵敏，而且其装置轻便、便于携带，被认为是在成本、时效等有 较高要求的场合实现生物传感器检测的首选方法之一。目前分析检测工作越来越多的面对多目标 物的实时、在线分析检测，而在多目标物同时分析检测方面，尤其是建立智能化、自动化的分析 检测系统方面，分子逻辑门无疑扮演着重要的角色，构建分子逻辑门也是设计分子计算机的先决 条件，而构建DNA计算机是人类的梦想之一。本论文将电化学方法与DNA分子逻辑门技术相结合， 实现了对多种食源性致病菌特征DNA的同时分析检测，还初步研究了构建具有基本逻辑运算功能 的DNA分子逻辑门体系(DNA半加器)，为DNA计算机的研究和发展做一些基础性的探索和铺垫工 作。本论文主要研究内容如下： (1)基于DNA诱导生成AgNCs(银纳米簇)的NOR型逻辑门用于多目标DNA的同时检测； 本实验以DNA为模板诱导生成AgNCs，以大肠杆菌(E．coli)DNA和沙门氏菌(Sal)DNA作为 输入，Ag+电化学信号作为输出构建一个NOR型逻辑门，达到同时检测E．coli DNA和Sal DNA 的目的。检测Sal DNA所得结果：在5．0x10。‰8．5x10～mol·L‘1检测范围内，其线性方程为 Ip_．1．5x10。4(Csdmol·L‘1)+0．48，相关系数R=0。9956，检测限(S府归3)为3．3x10一tool·L～；检测E．coli DNA所得结果：在5．0x10s～8．5x101mol·L。1检测范围内，其线性方程为ID=．1．1x104(CE．colJrnol·L-1) +O．54，相关系数R=0．9932，检测限(S／N=3)为2．1x10一tool·L．1。 (2)以GO／AuNPs(氧化石墨烯，金纳米粒子)纳米复合材料为基底构建ID B和OR型逻辑门； 本实验采用滴涂法和电沉积法制备了氧化石墨烯／金纳米粒子(GO／AuNPs)复合膜纳米阵列电 极。以GO／AuNPs复合膜修饰玻碳电极为工作电极，以志贺氏菌(Shi)DNA和沙门氏菌(Sal)DNA 作为输入，Fc的电流信号作为输出，分别构建了IDB型和OR型DNA分子逻辑门。其检测SalDNA 所得结果：在1．0x10。2~1．OxlO’’tool·Ld范围内有良好的线性关系，其线性方程为 Io一0．024109(Csal／m01．L“)+0．39，相关系数R=O．9993，检N限(S／N=3)为6．5x 10“3 tool-L一。这两种 逻辑门都达到了同时快速检测志贺氏菌DNA和沙门氏菌DNA的目的。 (3)借助DNA四面体纳米结构自组装探针构建NOR型逻辑门； 本实验选择四条白相互补的DNA单链，形成刚性和稳定的四面体DNA纳米结构自组装到金 电极表面，通过对四面体一臂DNA的刺激仂日入目标DNA)，改变DNA四面体的构型。以志贺 氏菌(shi)DNA和大肠杆菌(E．coli)DNA作为输入，Fc的电流信号作为输出，构建NOR型逻辑门 达到同时检测SiftDNA和E．coliDNA的目的。检测ShiDNA所得结果：在5．0x10-9～7．5x10。7tool·L。1 检测范围内，其线性方程为ID_-0．24109(Cshi／mol·L1)+3．12，相关系数R=0．9928，检测限(srs=3) 为2．1×10一tool·L～；检测E．coli DNA所得结果：在3．0x10-10 1．5x10～tool·L-1检测范围内，其线性 方程为Ip=．0．28109(CE．coh／mol·L-1)+3．8，相关系数R=0．9978，检测限(s／N=3)为6．1x10以1 tool·L一。 (4)DNA半加器的构建及对两种病原菌DNA的同时检测； 本实验以GO／AuNPs复合膜修饰玻碳电极为工作电极，探针DNA分别标记有两种电化学活 性指示剂(vc，MS)，在同一检测体系，同时检测两种指示剂的信号变化，以大肠杆菌(E．coli)DNA 和沙门氏菌(Sal)DNA作为输入，分别以AIr√m+AIF。和f△I尬／△IF。『为不同的输出，构建了AND和 XOR型逻辑门，而这两种逻辑门的组合刚好构建了半加器。为放大电化学响应，以目标DNA浓 万方数据 度C 度C对∑1△I|f乍线性曲线。检测E．coliDNA所得结果：在1．0×10m～1．0x10一tool’L-1检测范围内， 其线性方程为(1△IF。H△b血『)_2．1 7109(CE。1／mol·L’1)+32．03，相关系数R=0．9