地附补肾颗粒对去卵巢所致骨质疏松症大鼠作用的实验与机制探讨-药理学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 1 地附补肾颗粒对去卵巢所致骨质疏松症大鼠作用的实验及机 制探讨 研究生：丁海虎 指导老师：王迪生 中文摘要 目的： 通过观察地附补肾颗粒（DI-FU Kidney-Tonifying Granule，DFKTG）对去除卵 巢所致骨质疏松症模型大鼠的防治作用，初步探讨本方抗肾虚致骨质疏松症的作 用及作用机制，为阐述其临床疗效提供理论基础，并为进一步开发治疗骨质疏松 症的中药方剂提供实验及理论依据。 方法： 1.复制肾虚致骨质疏松模型：将 72 只 SD 雌性大鼠随机分为 6 组：假手术组、 模型对照组、阳性对照组、地附补肾颗粒高、中、低剂量组，每组 12 只，除假手 术组外，其余组采用去势法切除大鼠双侧卵巢复制肾虚型骨质疏松动物模型； 2.造模第 10 天起，大鼠按阳性对照组（0.27g/kg）、地附补肾颗粒高（11.72g/kg）、 中（5.86g/kg）、低（2.93g/kg）剂量灌胃给药，连续给药 8 周并观察记录大鼠精神 状态等情况； 3.于末次给药后，禁食 24h，麻醉、取血、切除子宫，取大鼠左后腿股骨； 4. 测定子宫重量、子宫指数，采用双能 X 线吸收法骨密度仪测定骨密度（BMD）， 放免法测定血清雌激素（E2）、钙离子（Ca2+）碱性磷酸酶（ALP）、抗酒石酸碱性 磷酸酶(TRAP)、白介素-6（IL-6）、护骨素（OPG）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、 降钙素相关基因肽（CGRP）含量。 结果： 1. 地附补肾颗粒通过滋阴养血、填精补髓、补骨强筋，改善大鼠肾虚症状， 如皮毛、活动等。 2.地附补肾颗粒能显著提高大鼠子宫指数，与模型对照组相比有显著差异性（P ﹤0.05、P﹤0.01），其中地附补肾颗粒中剂量组明显提高子宫指数。 3.地附补肾颗粒能明显提高大鼠 BMD 水平，与模型对照组相比具有显著性差 异（P﹤0.01）。 4. 地附补肾颗粒能显著提升大鼠血清中 E2 水平，与模型对照组相比有显著性 差异（P﹤0.01）；雌激素水平提高促进 1,25-(OH)2D3 分泌从而间接提高血钙水平， 结果显示地附补肾颗粒能显著提高大鼠血清中 Ca2+水平，与模型对照组相比有显 著差异性（P﹤0.05、P﹤0.01）。 5. 地附补肾颗粒显著降低大鼠血清中 TRAP、ALP 水平，与模型对照组相比 有显著差异性（P﹤0.05、P﹤0.01），进而调节破骨细胞和成骨细胞增殖，抑制骨 高转换率。 6.地附补肾颗粒中、高剂量能显著降低大鼠血清中 IL-6、MMP-9 的表达，降 低破骨细胞活性；与模型对照组相比，差异具有显著性（P﹤0.01、P﹤0.05）。 7. 地附补肾颗粒能提高大鼠血清中 OPG 水平，与模型对照组相比具有显著性 差异（P﹤0.05、P﹤0.01），通过提高 OPG 水平拮抗破骨细胞的前体细胞分化成破 骨细胞，减少骨质丢失。 8. 地附补肾颗粒能提高大鼠血清中 CGRP 的表达水平，与模型对照组相比具 有显著性差异（P﹤0.05、P﹤0.01）。 结论： 1.肾虚致骨质疏松模型对照组大鼠骨密度、雌二醇、子宫指数显著降低，血 清中 ALP、TRAP 显著表达，骨转换率显著提高，证明 去势法切除大鼠双侧卵巢 可以成功复制肾虚型骨质疏松动物模型； 2.地附补肾颗粒滋阴养血、填精补髓、补骨强筋，对肾虚致骨质疏松模型大 鼠具有良好的防治作用，改善肾虚症状。 .地附补肾颗粒提高大鼠子宫指数、E2 与 Ca2+，可能与类雌激素样作用、 1,25-(OH)2D3 产生和分泌间接促进小肠对钙的吸收提高血钙水平有关； .地附补肾颗粒能降低肾虚致骨质疏松大鼠的高骨转换率，抑制 IL-6、MMP-9 的高表达，调节骨吸收和骨形成之间的平衡，有效的维持骨量从而提高骨密度， 也可能通过提高 OPG、CGRP 表达水平的作用机制，拮抗破骨细胞的前体细胞分 化成破骨细胞，减缓骨吸收过程，改善骨丢失状态，其具体作用机制有待进一步 研究。 关键词：地附补肾颗粒；肾虚；骨质疏松；作用；机制 Effect And Mechanisms of DI-Fu Kidney Tonifying Granule on Osteoporosis in ovariectomized rats Graduate: Ding Hai-hu Supervisor: Wang di-sheng Objective: Abstract This study was designed to observe the effect of DI-Fu kidney-tonifying granule （DFKTG）of TCM on osteoporosis in ovariectomized rats,and to