浅谈提取植物组织RNA的准备工作和操作规范.docVIP

浅谈提取RNA前的准备工作 1、提取RNA操作全程及配制RNA提取试剂必须穿实验服,戴口罩和一次性手套,触摸皮 肤(例如面部)、门把手及实验室其他未处理过RNase的普通物体表面后立即更换手套。 2、器具干烤:需要干烤的器具包括金属和玻璃制品,如研钵、钥匙、镊子、剪刀、试剂瓶 (200mL、500mL、1L)、量筒(50mL、100mL)、烧杯,即所有在配制RNA提取试剂过程中需要用到的玻璃器皿均需要干烤处理。所有干烤的器具均用锡箔纸包住,如研钵、钥匙、镊子、剪刀和匀浆器,容器用锡箔纸封口,如试剂瓶、量筒和烧杯。180℃干烤6h后放入RNA专用柜中备用。 3、DEPC水的处理:用于处理枪头、试剂瓶盖和离心管等塑料制品的0.1%的DEPC水可以在 烧杯中配制,磁力搅拌器上搅拌过夜,搅拌过程中用锡箔纸封口。用于配制RNA提取试剂的DEPC水需要在干烤过的试剂瓶中配制,盖上瓶盖搅拌过夜后121℃灭菌20min。4、枪头、离心管和试剂瓶盖用0.1%DEPC水过夜处理后用报纸包好高温灭菌,移液器必须 是专用的,用之前用DEPC处理的水配制的75%酒精擦拭整个移液器,特别是枪杆。超净台的处理:用DEPC处理的水配制的75%酒精擦拭干净后,用氯仿快速擦拭,再用75%酒精擦拭,将提取所需的物品放入超净台,并用75%酒精擦拭,另放置一个废物缸,表面喷酒精,上述完成后,超净工作台紫外灯