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第二讲第一章基因工对程概述周四
第二节 基因工程研究发展史 一、基因工程准备阶段 1944年美国微生物学家 Avery及其同事通过转化实验,证实遗传物质是DNA(基因载体)。 1953年,Watson(美国)和Crick(英国)提出了DNA双螺旋结构模型,DNA双螺旋中两条链的碱基具有互补的特点,预示了DNA复制是半保留复制,同时指出遗传信息储存在DNA分子碱基序列之中。 “中心法则”。1958年Crick在DNA双螺旋学说基础上提出。 遗传密码的破译。1961年Nirenberg用人工合成mRNA破译出第一个遗传密码到1969年确定全部遗传密码,人们了解了大多数生物遗传信息表达的规律。从遗传密码表中我们可以看到mRNA中每3个核苷酸组成一个密码子,体现一个氨基酸的信息。 遗传密码的通用性。在64个密码子中,其中61个分别代表各种氨基酸,剩余的3个密码子(UAA、UAG、UGA)为肽链的终止信号,不代表任何氨基酸,这套密码从细菌到人都可通用。 二、基因工程的问世 1973年,Cohen等人将编码Kan(卡那霉素 )抗性基因质粒R6-5和编码Tet(四环素)抗性基因质粒pSC101混合后,加入EcoRI进行酶切,用T4 DNA连接酶连接成重组DNA分子,最后转化大肠杆菌,结果某些转化菌落表现出既抗Kan又抗Tet的双重抗性特性。从这种双抗性转化菌落的大肠杆菌中分离出的重组质粒DNA带有完整pSC101分子和一个来自R6-5质粒编码Kan抗性基因DNA片段。 三、基因工程的迅速发展阶段 自基因工程技术问世以来,这三十多年是基因工程迅速发展的阶段。不仅发展了一系列新的基因工程操作技术,而且构建了多种供转化原核生物和动物、植物细胞载体,获得大量转基因菌株。 1981年首次通过显微注射培育出世界上第一个转基因动物―转基因小鼠(将大鼠生长素基因转到小鼠)。 1982年,基因工程胰岛素商品在美国投放市场。 1982年,采用农杆菌介导法培育出世界上第一例转基因植物―转基因烟草。 1985年基因工程微生物杀虫剂通过美国环保署审批,1990年基因治疗开始进入临床试验。 1.基因工程克隆载体的研究 2.基因工程受体系统的研究 3.目的基因研究 医药相关的基因 抗病虫害和恶劣生境的基因 编码具有特殊营养价值的蛋白或多肽的基因 4.基因组研究。1990年开始,先后由美国、英国、日本、德国、法国、中国等国实施“人类基因组计划”,2003年完成全部序列测定,共编码约3-3.5万个基因。至1998年完成基因组测序的生物有11种,如幽门螺旋杆菌(1667867bp,1590个基因)等。 5.基因工程工具酶的研究 6.基因工程新技术研究 二、应用研究 尽管基因工程出现后的一段时间内带给人们的是猜疑和恐惧,但实践表明,基因工程已经给人类带来了难以估量的经济和社会效益。特别是对人类所面临的能源、粮食、环境和健康等日趋严重的社会问题,基因工程正在并且将要发挥越来越大的作用。 1. 基因工程与农业 光合作用 固氮作用 转基因植物 转基因动物 产生次生代谢产物 1. 基因工程与农业 (1)基因工程与光合作用。提高光合作用效率将是提高农作物产量的一个有效方法。 (2)生物固氮的基因工程。若能把禾谷等非豆科植物转变为能同根瘤菌共生,或具固氮能力,将代替无数个氮肥厂。 (3)转基因植物。增加农作物产品的营养价值,如:增加种子、块茎的蛋白质含量,改变植物蛋白的必需氨基酸比例等。提高农作物抗逆性能如:抗病虫害、抗旱、抗涝、抗除草剂等性能。 (4)转基因动物。 (5)产生次生代谢产物。如吲哚乙酸,赤霉素等。 2. 基因工程在工业中的应用 (1)环保工业 DNA重组得到石油、农药、工业污染物降解等质粒,用于污水处理等。 (2)酶制剂工业 利用基因工程技术生产酶,如蛋白酶、淀粉酶等。 提高酶的产量,如基因工程技术使DNA连接酶产量提高了500倍。 耐热、耐压、耐盐酶的研制,如利用基因工程技术生产初耐热的α-淀粉酶。 2. 基因工程在工业中的应用 (3)食品工业 转基因植物,改良作物品质,如降低豆油中的软脂酸成分从而降低冠心病的发病率。 利用基因工程菌生产柠檬酸、乳酸、苹果酸等。 利用基因工程菌生产高产生产谷氨酸等。 (4)化学与能源工业 石油开采,如降低石油粘度,提高深层石油石油流出量。 将淀粉转化为乙醇,如将马铃薯、玉米,大米转化为乙醇。 将纤维素转化为乙醇(研究阶段,已取得一定成就)。 3.基因工程在医学中的应用 (1)基因工程药物 多肽和蛋白类药物。如,重组人胰岛素、IL-2、干扰素、肿瘤坏死因子等。 酶类基因工程药物。如,尿激酶原、链激酶(均可治疗血管栓塞类疾病 )等。 (2)基因诊断和基因治疗 基因诊断。利用重组DNA技术直接从D
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