第四章-们2培养基.ppt

1. 苯乙酸在青霉素发酵培养基中的作用是（ ） A、诱导剂 B、氮源 C、前体 D、消泡剂 2.尿素用来制备培养基，是做为（ ） A.碳源 B.氮源 C.诱导剂 D.消泡剂 3．在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为 （? ） ①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 A.①②⑥⑤③④ 　 B.⑥①②⑤③④ ?C.⑥①②⑤④③ 　 D.①②⑤④⑥③ 4、以下哪种不是常用的无机氮源。（ ） A、铵盐 B、硝酸盐 C、氨水 D、尿素 5．下列营养物质中，不是同时含有碳源、氮源和生长因子的是（ ） A．牛肉膏 B．蛋白胨 C．生物素 D．酵母粉 有机氮源的作用 生理酸性物质、生理碱性物质 （举例） 生长因子 1. 菌体的同化能力 小分子进入细胞 大分子水解为小分子 2. 代谢的阻遏和诱导 碳源:葡萄糖效应 / 抑制产物的合成。 氮源:蛋白酶的生产-----受培养基中蛋白质或多肽的诱导，而受铵盐、硝酸盐、氨基酸的阻遏。 4. pH的要求 培养体系pH的波动 发酵过程中一般不主张直接用酸碱来调节pH 。 要保证在发酵过程中pH值满足工业的要求，合理配制培养基是决定因素，因而在配制培养基时，要考虑代谢后对培养体系pH的贡献，从而保证整个发酵过程中pH值处于较为适宜的状态。 二. 培养基的设计 已知组成微生物细胞的元素包括C、H、O、N、S、P、Fe、Mg、K等，在设计各种培养基（孢子培养基、种子培养基、发酵培养基）时，要充分考虑细胞的元素组成状况。 同时要考虑微生物对某些生长因子的特殊需求，以满足菌体的正常生长繁殖。 还要认真分析组成代谢产物的元素种类和数量，同时分析各种营养物质与代谢产物合成的内在联系。 （一）、 理论转化率的计算 理论转化率是指理想状态下根据微生物的代谢途径进行物料平衡计算，所得出的转化率的大小；实际转化率是指实际发酵过程中转化率的大小。 理论转化率可以通过反应方程式的物料衡算得出，例如青霉素生产中的代谢总反应方程式如下： 1 正交试验设计 1.1 正交试验设计的基本概念 正交试验设计是利用正交表来安排与分析多因素试验的一种设计方法。它是由试验因素的全部水平组合中，挑选部分有代表性的水平组合进行试验的，通过对这部分试验结果的分析了解全面试验的情况，找出最优的水平组合。 例：酵母产γ-氨基丁酸发酵培养基的优化 现代生物医学进展，11（3）：482-484 碳源选择 有机氮源的选择 无机氮源的选择 无机盐 正交试验设计 L9(34) 什么是RSM？ 如果不考虑综合可比性，而完全保证均匀性，让试验点在试验范围内充分地均匀分散，不仅可大大减少试验点，而且仍能得到反映试验体系主要特征的实验结果。 这种完全从均匀性出发的试验设计，称为均匀试验设计（uniform design）。 均匀试验设计的基本思想 均匀试验设计的特点 例如 74试验，全面试验要做2401次，正交试验也至少要做72＝49次试验，而用均匀试验仅需7次。 因此，对于多水平的多因素试验、试验费用昂贵或实际情况要求尽量少做试验的场合，或筛选因素及收缩试验范围进行逐步寻优的情况，均匀设计都是十分有效的试验设计方法。 1.在因素水平较多的情况下，可以节省大量的试验工作量 对其试验结果的处理不能采用极差或方差分析，而必须用回归分析，所以试验结果处理较为复杂，这是均匀设计的一个缺点。 2.均匀设计的试验结果不具有综合可比性 均匀设计表 与正交试验设计相似，均匀设计也是利用一种表格来安排试验的，我们称之为均匀设计表（table of uniform design），简称为均匀表。 等水平均匀设计表 均匀设计表 因素个数 U n（ t q ） 试验次数 因素水平数 各符号的含义如下： 1.等水平均匀设计表的表达形式 → Un(tq) 表7－1 U5（54）均匀表 7.2 均匀设计表 3.等水平均匀设计表的特点 ①每个因素的每个水平只做1次试验 表7-1是一张最简单的等水平均匀设计表U5(54)，它最多可安排4个因素，每个因素5个水平，共做5次试验。 ②任意2个因素组成的试验组合画在平面格子点上，每行每列恰好有1个试验点 （a） (b) 图7-1 均匀表不同列的组合分布