蛋白酪氨酸磷酸酶(ptps)抑制剂的设计合成及活性研究-化学生物学专业论文.pdf.docxVIP

摘要摘要 摘要 摘要 蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)是一类重要的信号酶，它在细胞生长、分化、 新陈代谢、细胞循环过程、细胞间通讯、细胞迁移、基因转录、离子通道活动、 免疫应答和细胞凋亡等过程中有着非常重要的意义。蛋白酪氨酸磷酸化水平异 常，会导致多种人类疾病，例如肿瘤、自身非免疫性疾病和糖尿病。因此，高 效高选择性的PTP小分子抑制剂不仅为阐明PTPs在细胞信号中的作用提供了有 力的研究工具，同时还能够发展成为糖尿病和癌症等疾病的治疗药物。由于所 有的PTPs的活性位点具有高度的结构保守性，因此设计高亲和性、高选择性的 PTP抑制剂是一个挑战。有研究结果已经证明PTPs与底物的高亲和性结合并不 只是由于酪氨酸磷酸酯片段(pTyr)的存在，pTyr附近的残基对PTPs的底物识 别也有着非常重要的作用。 本文选择水杨酸片段为pXyr模拟物、利用组合化学的思想发展了PTP小分 子抑制剂化合物库。化合物结构中含有以下三个部分：能够与活性位点相结合 的水杨酸片段、与第二结合位点有相互作用的结构多样的胺或肼片段以及连接 上述两个功能片段的四个长短各相差一个亚甲基的烷基链。 设计并合成了化合物库I(内含80个化合物)，并从中筛选出一个具有高 效性和高选择性的mPTPB抑制剂I-A09。它对mPTPB的抑制活性是对mPTPA 的61倍，是对其他测试的PTPs的l 1倍。酶动力学分析显示I-A09是可逆且非 竞争性mPTPB抑制剂。同时，在巨噬细胞中I-A09对mPTPB的抑制作用会使 由细菌磷酸酶诱发的宿主免疫反应的变异发生反转，从而阻止结核病菌在宿主 细胞中的生长。 设计并合成了化合物库II(内含212个化合物)，并从中筛选出一个具有高 效性和高选择性的SHP2抑制剂II．B08。II．B08拥有非常有效的细胞活性，它能 够阻碍生长因子刺激的细胞外信号调节激酶1／2(ERKl／2)的活化，同时有效的 减少了SHP2突变体诱导的、与GM．CSF有响应的造血祖细胞过度增殖。 SHP2·II．B08的共结晶结构显示出水杨酸片段占据了活性位点，同时远端的联苯 基团与SHP2之间有疏水性作用。 设计并合成了化合物库Ⅲ(内含212个化合物)，并从中筛选出一个具有高 效性和高选择性的SHP2抑制剂L31A21。该化合物也显示出对SHP2很好的抑 摘要制活性，同时L31A21也对SHPl和PTPlB具有相似的抑制活性。 摘要 制活性，同时L31A21也对SHPl和PTPlB具有相似的抑制活性。 最后，尝试性的合成了双特异性蛋白酪氨酸磷酸酶(DSPs)的小分子抑制 剂。经过测定，化合物L64．02对Cdcl4A具有较好的抑制活性，但是它对SI-IP2 (胞质类蛋白酪氨酸磷酸酶)也具有相同的抑制活性。同时发现三并环类化合 物对Laforin有激活作用，其中化合物L64．04可以使Laforin的活性提高近8倍。 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶，抑制剂，水杨酸，Click反应，化合物库 Il AbstractAbstract Abstract Abstract Protein tyrosine phosphatases(PTPs)ale important signaling enzymes that control such fundamental processes as cell growth，differentiation，metabolism，progression through the cell cycle，cell-cell communication,cell migration，gene transcription,ion channel activity,the immune response，and apoptosis／survival decisions．Abnormal regulation of PTP activity causes aberrant tyrosine phosporylation,which contributes to the development of many human diseases including cancers，autoimmune disorders and diabetes．Thus，potent and selective small molecule PTP inhibitors will not only serve as powerful research tools for elucidating the roles of PTPs in cellular signaling but also hold promise for therapeutic development in a