南方红豆杉愈伤组织培养及其紫杉烷二萜类成分的分析.PDF

·2696 · 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 18 期 2014 年 9 月 南方红豆杉愈伤组织培养及其紫杉烷二萜类成分的分析 1 1 1, 2* 1, 3 1 姚 晓 ，步 达 ，陈建伟 ，李 祥 ，汤 彬 1. 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023 2. 江苏省方剂研究重点实验室，江苏 南京 210023 3. 江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京 210023 摘 要：目的 研究南方红豆杉愈伤组织的出愈时间、诱导率、生长率、生长状态、褐变程度，比较愈伤组织中紫杉醇等 5 种紫杉烷二萜类成分的量。方法 采用单因素比较、正交试验设计，研究影响南方红豆杉愈伤组织诱导和生长的各种因素； 采用 HPLC 法测定不同来源愈伤组织中 10-脱乙酰基巴卡丁 III （10-DAB）、巴卡亭 III、三尖杉宁碱、紫杉醇和东北红豆杉 素 5 种紫杉烷二萜类成分的量；采用加权评分综合考虑以上各因素优选组织培养条件。结果 外植体脱分化形成愈伤组织的 能力，以完整叶片及茎段最好；暗培养有利于紫杉醇等 5 种萜类成分的富集；愈伤组织诱导的最适培养基为 B5 ＋2, 4-D 3.0 mg/L ＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L ＋KT 0.5 mg/L 。结论 南方红豆杉愈伤组织诱导、培养与外植体种类、培养基种类、 光照有较大关联，紫杉醇等 5 种紫杉烷二萜类成分的富集受植物生长调节剂种类及浓度影响显著。 关键词：南方红豆杉；愈伤组织；加权评分；紫杉醇；紫杉烷二萜类 中图分类号：R931.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)18 - 2696 - 07 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.18.023 Tissue culture and analysis on taxane diterpenoids in callus of Taxus chinensis var. mairei 1 1 1, 2 1, 3 1 YAO Xiao , BU Da , CHEN Jian-wei , LI Xiang , TANG Bin 1. College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China 2. Jiangsu Key Laboratory for TCM Formulae Research, Nanjing 210023, China 3. Jiangsu Key Laboratory for Chinese Material Medica Processing, Nanjing 210023, China Abstract: Objective To investigate some factors which could influence the tissue culture of callus from Taxus chinensis var. mairei such as the culturing callus time, callus induction rate, callus development rate, growth rate, and browning degree. Then, the five taxane diterpenoids including paclitaxel in callus were studied and compared. Methods The factors which influence the T. chinensis var. mairei callus induction and growth rate were studied by single factor analysis and orthogonal test de