依娜普利 厄贝沙坦及血管紧张素17对快速心房起搏犬心房结构重构中及ras系统的影响.docx

天津医科大学博士学位论文中文摘要 天津医科大学博士学位论文 中文摘要 目的：通过右心房快速起搏(500次／rain)2周建立慢性快速心房起搏犬模型， 观察右心房组织病理学改变，以及血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素转换 酶2(ACE2)、血管紧张素II受体亚型(ATlR、AT2R)、细胞外信号调节激酶 (ERK)、磷酸化的细胞外信号调节激酶(P．EI涿)、及Mas受体的表达情况， 同时应用依那普利、厄贝沙坦和血管紧张素．(1．7)[Ang．(1．7)]为干预措施，观察 其对快速心房起搏诱发的结构重构及肾素．血管紧张素系统(RAS)的影响。 方法：普通成年杂种犬30只分为5组，分别为假手术组(Sham，S组)、心房 起搏对照组(Control，C组)、心房起搏+依那普利干预组(Enalapfil，EN组)、 心房起搏+厄贝沙坦干预组(kbesartan，IB组)、心房起搏+血管紧张素．(1．7)干 预组(Ang。(1．7)，A组)，每组6只。所有犬经戊巴比妥钠静脉麻醉后，经颈外 静脉置入右心房起搏电极，电极远端连接特制心房起搏器，起搏器埋于肩胛后 囊袋中。除假手术组外，其余各组均给予起搏刺激，起搏模式AOO，起搏电压 5V，脉宽0．2ms，频率500次／分，维持起搏2周。EN组及IB组分别于起搏开 始前3天开始给予口服依那普利2mg·kfl·d．J或厄贝沙坦60mg·kg1．d～，维持至实 验结束。A组犬皮下埋置Alzet@渗透泵，经颈外静脉给予Ang-(1-7)6嵋·Kg-1·h-1， 持续泵入至实验结束。2周后取右心房肌组织，一部分用于提取组织总RNA并 应用RT-PCR方法检测各组ACE2和ATlR的mRNA表达情况。一部分置于10％ 中性福尔马林溶液中固定，制作石蜡切片，应用HE染色观察心房肌细胞及组织 结构的病理学改变，应用免疫组织化学法观察各组ACE、ACE2、ATlR、AT2R、 ERK、P．ERK和Mas的蛋白表达情况。一部分用于提取组织总蛋白，应用 WesternBlot方法检测各组ERKl／ERK2的蛋白表达情况。 结果：1．心房组织RT-PCR结果显示，起搏2周后C组ACE2 mRNA表达较S 组降低，但未达到统计学差异(胗0．05)，ATlR mRNA表达水平较S组显著升 高(P0．05)，应用依那普利、厄贝沙坦、Ang．(1．7)干预使ACE2 mRNA表达 增加，与起搏组有显著差异(p，o．05)，ATlR mRNA表达水平下调，EN组和 IB组较C组有显著差异(p0．05)。2．心房组织病理学HE染色显示，起搏2 周可导致实验犬心房肌细胞大小不均，细胞排列紊乱，并可见明显的脂肪组织 浸润，心肌间隙可见纤维组织填充。依那普利、厄贝沙坦和Ang一(1—7)可明显减 天津医科大学博士学位论文轻起搏2周诱发的心房结构重构。3．心房组织免疫组化结果显示，心房快速起 天津医科大学博士学位论文 轻起搏2周诱发的心房结构重构。3．心房组织免疫组化结果显示，心房快速起 搏2周后可引起心脏局部ACE、ATlR、AT2R、ERK、P．ERK和Mas受体蛋白 表达增加，C组免疫组化阳性染色程度显著高于S组(砌．05或P0．001)，应 用依那普利、厄贝沙坦和Ang．(1．7)后ERK、P．ERK、Mas表达明显降低(与C 组比较P0．05或P0．001)，厄贝沙坦和Ang．(1．7)干预可使ACE、ATlR表达 显著下调(与C组比较P0．05或P0．001)，Ang．(1．7)可引起AT2R表达显著 下降(与C组比较P0．05)。ACE2表达在C组显著低于S组(尸0．001)，应 用依那普利、厄贝沙坦和Ang．(1．7)后ACE2表达明显上调(与C组比较P0．05)。 4．心房组织Western Blot结果显示，心房快速起搏2周后ERKl／ERK2蛋白表达 明显上调(与S组比较P0．05)，依那普利、厄贝沙坦和Ang．(1．7)干预可显著 降低EIⅨ1／2的水平(与C组比较P0．05)。 结论：快速心房起搏2周可诱发明显的心房结构重构，并伴有心脏局部的RAS 活化，表现为ACE、ERK、P．ERK和Mas的蛋白表达增加，ACE2的mRNA水 平和蛋白表达水平均下调，ATlR的rrtRNA和蛋白表达水平均上调。依那普利、 厄贝沙坦和Ang．(1．7)干预可减轻心房结构重构的程度，降低起搏后RAS及AngII 介导的ERK信号通路的活化，有效抑制房颤形成与维持的基质。 关键词： 心房颤动心房起搏心房结构重构肾素．血管紧张素系统细胞外信 号调节激酶血管紧张素一(1-7) II 天津医科大学博士学位论文Abstract 天津医科大学博士学位论文 Abstract Objective：To observe th