临床生化检验基础.pptVIP

. 临床生物化学检验基础 主要内容 概 述 临床生化检验：主要是运用物理学、化 学、生物学等实验室技术和方法，通过感官、 试剂反应、仪器分析和动物实验等手段，对 病人的血液、体液、分泌液、排泄物等标本 进行检验，以获得反映机体功能状态、病理 变化或病因等的客观资料。 标本种类： 血液 尿液 脑脊液 胸腹水 精液 检 测 试 剂 其他显色反应 ： TP为例： 蛋白质中的肽键在碱性溶液中与铜离子作用产生紫红色络合物，导致540nm吸光度的增加，增加程度与蛋白质的含量成正比。 碱性条件 肽键 + Cu2+ → 紫红色络合物 检 测 试 剂 试剂使用注意事项： 干粉试剂在干粉状态下保存时间长，复溶后一般不超过3天； 配成“工作液”后保存时间很短，一般1～2天； 双试剂不能擅自改成“工作液”。 检 测 试 剂 试剂失效的判定方法： 通过试剂空白吸光度、颜色、PH值、查看反应曲线等来判断。 通过观看以往的正常反应曲线很重要；试剂空白吸光度在试剂说明书中说明，如AST、ALT，通常应在1.5A以上等 试剂线性范围： 生化试剂线性范围是指测试结果与反应度R成线性的范围，根据试剂说明书给定输入。 生化试剂线性范围实际上是指该试剂所能检测到的样本最高浓度。 当出现超出线性范围时，应对样本进行稀释后重新测量。 检 测 试 剂 常用生化项目按化学性质分类： 酶 类 底物代谢类 无机离子类 特种蛋白类 检 测 试 剂 常用生化项目按临床性质分类： 肝功能 肾功能 血糖 血脂 心肌酶谱 检 测 试 剂 胰腺炎 无机离子 痛风 中毒 前列腺疾病 免疫性疾病 免疫炎症反应 常见生化项目之间的关系： GLO＝TP－ALB A/G＝ALB/GLO O/P＝AST/ALT I-BIL＝T-BIL－D-BIL AⅠ/B＝ApoAⅠ/ApoB CK-MM＝CK－CK-MB LDL-C＝T-CHO－HDL-C－TG/5（重量单位） ＝T-CHO－HDL-C－TG/2.2（法定单位） AG＝Na＋―Cl－―HCO3－ ＝Na＋＋K＋―Cl－―HCO3－ 检 测 试 剂 检 测 方 法 生化基本原理： Lambert-Beer定律，即吸光度与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比。 A=-LogT=-Log(It/I0)=ε CL 当溶液液层的厚度L，光的波长和其它条件均固定不变ε，则所得的吸光度与溶液中有色物质的浓度成正比： A=kC，k＝εL 方法： 吸收光谱法：比色分析基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。 比浊法：通过监测物质对光的散射透射强度来测定的方法，比浊法是一种浊度测定，而不是比色测定。 检 测 方 法 吸收光谱法： 终点法 一点终点法 二点终点法 动力学法（零级动力学法） 固定时间法（一级动力学法） 检 测 方 法 终点法： 一点终点法公式： C样本＝(A样本－A试剂空白/A标准－A试剂空白)×C标准 F＝C标准/（A标准－A试剂空白） C样本＝（A样本－A试剂空白）×F 反应度计算：R＝ A样本－A试剂空白 检 测 方 法 终点法： 二点终点法（样本空白法）公式： C样本＝(A样本－A样本空白/A标准－A标准空白)×C标准 F＝C标准/（A标准－A标准空白） C样本＝（A样本－A样本空白）×F 反应度计算：R＝ A样本－A样本空白 检 测 方 法 动力学法： 因数法：△A样本＝A样本－A试剂空白 C样本＝（?A样本/min）×F ?A样本/min：每分钟样本吸光度变化率 反应度计算： 检 测 方 法 动力学法： 摩尔消光系数法 ： C样本＝ ?A样本/min×Vt×1000 ε×VS×d F＝ Vt×1000 ε×Vs