壳聚糖β-甘油磷酸钠复合gbr屏障膜的制备及其性能研究-口腔临床医学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 山东大学博士学位论文壳聚糖／旦一甘油磷酸钠复合 山东大学博士学位论文 壳聚糖／旦一甘油磷酸钠复合6BR屏障膜的制备及其性能研究 博士研究生：崔军 专业：口腔颌面外科学 导Ni-徐欣教授 合作导师：孙康宁教授 中文摘要 研究背景与目的 由于颌骨与牙周组织的解剖生理特点、增龄性变化以及手术、外伤、炎症和 拔牙等导致的牙周支持组织缺损、三维骨量不足或骨量丧失等是目前临床常见的 问题。如何重建牙周支持组织、减少失牙、促进种植修复的长期成功率和美观效 果一直是牙周与种植治疗领域中的难题。引导组织再生(GTR)或引导骨再生(GBR) 技术是解决这一临床难题最常用、最有效的方法之一。GTR／GBR的原理是在牙龈 软组织与牙周(骨)缺损之间放置生物屏障膜，以阻止软组织长入、保持和支撑 缺损空间，最终实现完全牙周(骨)组织修复。使用屏障膜是GTR／GBR技术中的 关键环节，屏障膜的性能在一定程度上决定了GTR／GBR技术的成败。可吸收性屏 障膜由于使用方便、避免了不可吸收性膜需要二次手术的不足而得到广泛应用。 理想的可吸收性膜应具备良好的生物相容性、能选择性的引导组织再生、一定的 机械强度、易操作性、降解速率与组织再生进程协调等特性。而目前的可吸收性 膜仍存在吸收速率不易控制、机械强度低、临床可操作性差及缺乏骨诱导活性等 缺点，难以达到牙周组织再生的要求；也由于制备工艺复杂、成本高等原因而限 制了其临床应用。研制新型的可吸收生物膜，使其不仅具有阻隔软组织细胞的屏 障作用而且具有一定的促进组织再生活性，是目前医用可吸收生物屏障膜的发展 趋势。高分子多聚物壳聚糖以其良好的成膜性和生物活性而成为一种极具潜力的 膜材，但也存在只溶于酸性介质、脆性大、不易降解等缺点，通过与其它材料复 合及在碱性溶液中浸泡等方法可以克服这些缺点，但合成工艺繁琐。本研究利用 壳聚糖／p甘油磷酸钠(cs／13．GP)温敏凝胶体系具有在生理条件下发生相转变的特 山东大学博士学位论文性，加之其良好的生物相容性、制备工艺简单、不添加化学溶剂和交联剂、具有缓 山东大学博士学位论文 性，加之其良好的生物相容性、制备工艺简单、不添加化学溶剂和交联剂、具有缓 释性能等优点，制备cs／lB—GP复合引导骨再生屏障膜并对其进行结构表征、力学强 度测试和体内外的生物学性能研究，以期为制备一种工艺简单、成膜条件温和、 具有良好生物学性能和有效缓释生长因子的新型生物屏障膜提供研究基础。 方法 1．CS／D．GP温敏凝胶及其复合膜的制备与表征：本实验使用的CS分子量(Mw) 约为为3．5×106Da、脱乙酰度(DD)95％，并用0．1M乙酸溶液配制成浓度为2．2％(w／v) 的CS溶液，并经1210C高压灭菌lO分钟。分别将O．4，0．6，0．8，1．0和1．29的B．GP 溶解于lmL去离子水，在冰浴中逐滴加入到CS溶液中，获得不同配比的的CS／B．GP 混合溶液。测定IB-GP浓度对凝胶体系pH值和在生理体温下形成凝胶时间的影响， 并初步观察凝胶的形貌特征。将不同配比的cslf3．GP混合溶液分别在平皿中铺膜， 并在370C条件下自然脱水干燥，制各成CS与I$-GP质量比分别为l：3(Ml膜)，l：4 (M2膜)，1：5(M3膜)与l：6(M4膜)的CS／fj．GP复合屏障膜。纯CS膜(Mo)在相 同条件下制备后，用0．5N的NaOH溶液中和2小时，去离子水反复冲洗后作为对 照。分别通过傅里叶红外光谱(FTIR)分析、X射线衍射(XRD)分析和扫描电 镜(SEM)观察对CS／p．GP复合膜的结构和形貌特征进行表征，并通过万能电子 拉力仪测试膜在液态环境中的拉伸强度。 2．体外实验部分：本实验部分对比研究和观察了不同配比的cso．GP复合膜 与纯CS膜在PBS溶液中的降解特性、溶胀度以及在1．5SBF中的矿化特性；进而 选择两种IB-GP含量不同的复合膜(M1．M3)，通过与体外小鼠骨髓基质细胞系ST2 细胞的共培养，观察cs／lB．GP复合膜对骨髓基质细胞体外活性的影响，包括增殖 活性、细胞在膜表面的粘附与生长以及ALP活性表达等。 3．体内实验部分：本实验部分通过Wistar大鼠(3月龄)皮下植入实验和颅骨 临界骨缺损修复实验，对比研究和观察了CS／p．GP复合膜与纯CS膜在体内的生物 相容性、降解特点、屏障作用及引导骨再生的性能。 4．复合膜性能改进的初步探索：利用羧甲基壳聚糖(CMCS)络合钙离子的特 性合成新型含钙化合物一羧甲基壳聚糖钙(CCC)，通过FTIR、XRD对其进行结 构表征，并检测其与BMSCs的细胞相容性。在CS／lB．GP温敏凝胶体系中加入不同 2 山东大学博士学位论文质量的 山东大学博士学位论文 质量的CCC，观察其对凝胶时间的影响；在c