成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响-药物分析杂志.PDF

药 物 分 析 杂 志 Chin J Pharm Anal 2018,38(10) ·1727· 成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素 * 武刚 于传飞 王文波 王兰** ， ， ， （中国食品药品检定研究院，卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室，北京 102629 ） 摘要　目的：评价尿素、聚焦时间、pI 标记物3 个因素对成像毛细管等电聚焦电泳（iCIEF ）测定抗HER2 -1 单抗、抗VEGF 单抗主峰等电点结果的影响。方法：应用iCIEF 技术，通过添加尿素（2 mol · L ），改变聚 焦时间（6、8、10 min ）和pI 标记物的数量（2 个/6 个），对2 种单抗制品主峰等电点进行测定。结果：抗 -1 HER2 单抗使用6 个pI 标记物，添加终浓度2 mol · L 的尿素，聚焦时间6、8、10 min，主峰等电点分别为 9.01 ±0.00、9.02 ±0.01、9.06 ±0.01 ；使用6 个pI 标记物，不添加尿素，聚焦时间6、8、10 min，主峰等电点 分别为9.07 ±0.01、9.08 ±0.01、9.09 ±0.01 ；使用2 个pI 标记物，主峰等电点范围为9.00~9.14 （含尿素）、 -1 9.04~9.17 （不含尿素）。抗VEGF 单抗使用6 个pI 标记物，添加终浓度2 mol · L 的尿素，聚焦时间6、8、 10 min，主峰等电点分别为8.32 ±0.00、8.35 ±0.00、8.35 ±0.07 ；使用6 个pI 标记物，不添加尿素，聚焦时间 6、8、10 min，主峰等电点分别为8.39 ±0.01、8.39 ±0.02、8.41 ±0.01 ；使用2 个pI 标记物，主峰等电点范围 为8.26~8.48 （含尿素）、8.34~8.49 （不含尿素）。结论：使用iCIEF 评价所选单抗等电点时，尿素、聚焦时间 两因素对等电点的计算结果影响较小，pI 标记物的选择对等电点的计算结果影响明显。 关键词：单抗；聚焦时间；尿素；pI 标记物；等电点；成像毛细管等电聚焦电泳 中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793 （2018 ）10-1727-06 doi ：10.16155/j.0254-1793.2018.10.09 Several factors on isoelectric point determination of monoclonal antibody by imaging capillary isoelectric * focusing electrophoresis （iCIEF ）