第18经典液六相色谱法.pptVIP

第十八章 经典液相色谱法 第一节 概述 经典液相色谱法：采用普通规格的固定相，常压输送 流动相的液相色谱法称～。 第二节 液-固吸附柱色谱（如M. Tsweet法） （一）分离原理 （二）常用吸附剂 （三）色谱条件的选择 （一）分离原理 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现分离 （二）常用吸附剂：多孔、微粒状物质 1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺 1. 硅胶（SiO2·H2O） 结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 表面硅醇基存在形式： 表18-1 硅胶和氧化铝的含水量与活性的关系 硅胶吸附特性2：与极性物质形成氢键 2. 氧化铝 碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质 物质极性↑，吸附能力↑，k ↑，tR ↑ （三）色谱条件的选择： 1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 判断物质极性大小的规律： ①基本母核相同，分子中基团的极性越强，整个分子的极性也越强 ②分子中双键越多，吸附能力越增，共轭双键多吸附力亦增大 ③化合物基团的空间排列对吸附性也有影响。如能形成分子内氢键的要比不能形成分子内氢键的相应化合物的极性要弱，吸附能力也弱 续前 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶”原则 ：根据组分性质、吸附剂的活性， 选择适当极性的流动相 常用的流动相极性递增的次序是： 石油醚＜环已烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜乙醚＜氯仿＜ 醋酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水。 续前 4. 三者关系图示： 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性 活性大 非极性或弱极性 第三节　平面色谱法的分类和参数 分类 　　薄层色谱法TLC： 吸附薄层色谱法 分配薄层色谱法 　　纸色谱法PC:分配色谱法 平面色谱参数 　 定性参数——比移值Rf 相平衡参数——K、k 分离参数——分离度R 1、定性参数 比移值(Rf值) 溶质移动距离与展开剂移动距离之比 Rf =L/L0 （定时展开） L为原点（origin）至斑点中心（质量重心）的距离 L0为原点至溶剂前沿（solvent front）的距离 ——类似保留时间（定距展开） 与组分及色谱条件有关 2、相平衡参数 分配系数K= Cs/Cm 容量因子 k= CsVs/CmVm K、k与Rf值的关系： 　　　　　 续前 1）K↑大，Rf↓小 2）薄层板一定，对于极性组分 展开剂极性↑大，Rf↑大（容易洗脱） 展开剂极性↓小，Rf↓小 （不容易洗脱） 3）Rf范围：0 Rf 1 Rf=0，K无穷大，组分在原点不动 Rf=1，K=0，组分斑点至溶剂前沿 Rf = 0.2——0.8（常用） 0.3——0.5（最佳） 影响比移值的因素 1）被分离物质的结构和性质 2）薄层板的性质 3）展开剂的极性 4）温度 5）展开槽内的展开剂蒸气饱和程度 重现性差，多用于定性 3、分离参数——分离度 分离度（R） 两相邻斑点中心距离与两斑点平均宽度（纵向直径）的比值 第四节、薄层色谱法 (thin layer chromatography；TLC) （一）概述 （二）吸附剂的选择 （三）展开剂的选择 （四）薄层板的制备 （五）定性与