生物制理品第三章.pptVIP

引起B细胞分化，分泌IL-6、IL-10等细胞因子和表达MHCII、B7-1、B7-2等表面分子，并阻止B细胞的凋亡。 直接激活单核细胞、巨噬细胞和树突细胞，分泌IL-12、INF-r等Thl样为主的细胞因子，并刺激MHCII、B7-1、B7-2的表达。 在IL-12协同下激活NK细胞，杀伤活性增强，并分泌IFN-r，IFN-r反过来进一步促进单核细胞、巨噬细胞和树突细胞的激活。 协同刺激抗原特异性B细胞和T细胞分化，在Thl细胞因子的作用下，显著增强获得性细胞免疫----优良的T细胞免疫佐剂。 1． CpGDNA对多种免疫细胞有激活作用 含有GACGTT-基序的CpG OND——小鼠淋巴细胞 含有AGCGTG基序的CpG OND——小鼠的NK细胞 含有GTCGTT基序的CpG OND——人淋巴细胞 含有ATCGAT基序的CpG OND——鸡外周血单核细胞 含有GTCGTT基序的CpG OND—牛B细胞的增殖和分泌IL-6 —PBMC分泌IL-6、IL-l2和IFN-r； 含有ATCGAT基序的CpG OND——猪 (Kamstrup，2001) 2．CpG OND免疫刺激作用具有物种和细胞特异性 CpGODN的体内效应与应用 1．对天然免疫系统的刺激活性 （1）抗感染 ：单核李斯特杆菌、利什曼原虫、 疟原虫、单纯疱疹病毒 （2）抗肿瘤活性 ：黑色素瘤 2. 对特异性免疫反应的调节作用—疫苗佐剂 （1）CpG ODN对蛋白质抗原的作用 能够增强许多抗原诱导的Thl型反应—HbsAg、牛疱疹病毒I型糖蛋白 D、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、疟疾的多肽、麻疹病毒、放线杆菌 胸膜肺炎、流感病毒疫苗、猫疱疹病毒、猫细小病毒和猫白血病病毒 （2）CpG ONG对DNA疫苗的作用 3．过敏性疾病治疗 霍乱毒素（CT） 大肠杆菌不耐热毒素（LT） 破伤风类毒素（TT） 基因工程减毒素 （一）霍乱毒素（CT） 良好的粘膜免疫佐剂 由A和B两个区构成的蛋白 B区具有主要免疫学作用，内含5种独立的非共价连接的B亚单 位（CTB），无毒性，可与细胞结合。 A区是CT的生物学活性部分，具有酶活性。 仙台病毒—CT；CTB—流感病毒HA；链球菌表面蛋白—CTB； CT毒素A和B两个亚单位的表达质粒DNA作为佐剂与DNA疫苗联和应用，还可诱导机体产生很强的Th1细胞因子反应（如IFN-γ）和Th2细胞因子反应（如IL-4），具有很强的佐剂作用。 （二）大肠杆菌不耐热毒素（LT） 大肠杆菌LT毒素有A和B两个亚单位，有一定抗原性 A亚单位基因工程点突变体LT(R192G) ——无毒性作用，但仍保留了其佐剂效应 ——可诱导机体产生局部粘膜免疫反应。 利用基因突变技术，构建的A和B两个亚单位的表达质粒DNA联合应用，也可诱导机体产生很强的Th1细胞因子反应（IFN-γ）和Th2细胞因子反应（IL-4）。而且，LT毒素表达质粒作为佐剂，可协助DNA疫苗诱导机体产生更强的细胞免疫反应，有望成为一种新型免疫增强剂。 免疫刺激复合物（ immunostimulating complex， ISCOM） ISCOM由抗原物质与由皂树皮提取的一种糖苷Quil A和胆固醇按1:1:1混合后自发形成的一种具有较高免疫活性的脂质小泡。 ISCOM直径40nm，每个ISCOM约含10～12分子的蛋白质。 ISCOM应用于多种细菌、病毒和寄生虫病的疫苗，具有产生“全面”免疫应答的效力，可长期增强特异性抗体应答。 ISCOM能有效地通过粘膜给药，从而可以用于抗呼吸道感染。 目前，兽用ISCOM疫苗已在国外投放市场。 2、佐剂作用机理： 机理非常复杂，但可概括三个方面。（不同书有不同写法） ①抗原储存库延长抗原储存时间，延长抗原释放，加强抗原降解等； ②形成肉芽肿，促进炎症反应，增强吞噬细胞吞噬作用； ③刺激淋巴细胞增殖和转化。 二、佐剂分类 不溶性铝盐类佐剂