生命科学基础实验教学示范中刘心27.ppt

生命科学基础实验教学示范中心 ;第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化;第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化; 第一节 引言; 性质 方法 分子大小 透析、超滤、差速离心、凝胶过滤 溶解度 等电点沉淀、盐析、有机溶剂沉淀 电荷 电泳、离子交换层析 吸附性质 吸附层析 对配体分子 的生物亲和力 亲和层析;一、分离纯化的意义;;二、分离纯化的要求;三、分离纯化的一般程序;第二节 蛋白质（酶）、核酸 分离纯化的前处理;二、细胞的破碎;组织细胞的破碎方法很多，根据不同的实验规模，不同的实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条件也不同。 一般动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆器破碎或用超声波处理破碎； 植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁，一般常用??石英砂和适当的提取液一起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理也能达到目的； 细菌细胞的破碎比较困难，因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子，非常坚韧。破碎的方法常有超声波震荡、与石英砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理（以分解肽聚糖）。 ;;三、细胞器的分离;四、提取;1、蛋白质（酶）的提取;2、核酸的提取;蛋白质的