黄瓜花叶病毒cDNA载体在烟草细胞中表达外源基因.pdf

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卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$! ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$! - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 黄瓜花叶病毒!#$载体在烟草细胞中表达外源基因 雷万里 方荣祥 张国华 (中国科学院微生物研究所植物生物技术开放实验室,北京 ) !$$$2$ 摘 要 为了探讨利用黄瓜花叶病毒( )构建表达载体的可行性,分离了山东株( ) 的全长 AB% CD AB% E)F 1 。测定其全序列后,采用定点突变的方法在衣壳蛋白( )基因起始密码子处改造出一个 位点,可将外 @D)F AG 3# 源基因引入 位点和 基因终止密码子上游附近的 或 位点而置换掉 基因。分别用绿色荧光 3# AG 4( 5+, AG 蛋白( )基因、葡糖醛酸酶( )基因以及小鼠二氢叶酸还原酶( )基因 种报告基因置换 基因。将 H8G 0 HIC DJ8E 1 AG # 株 、 和 嵌合 的 分别插入 载体的 启动子和终止子之间,将 8, AB%E)F!E)F# CD0AB% E)F1 @D)F A+?? 17C / K 构建的置换型载体直接以质粒的方式转染烟草原生质体,表达了 种报告基因。 1 关键词 黄瓜花叶病毒,置换型载体,烟草原生质体 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) L2M F !$$$01$3!#$$!$!0$$4$0$3 [] 2 由于可以快速高效表达外源蛋白,以及研究植 质粒 由 博士惠赠;含 株 6 :E J+?6’== 8, 1-7 / 物与病原体的相互作用,植物病毒载体应用得越来 和 全长 的质粒

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