血型鉴定抗体四筛选交叉合血.pptVIP

输血和输血技术试验 血型鉴定 结果判读（ABO血型鉴定） 结果判读（Rh血型鉴定） 报告方式 XXX型，Rh +/- 注意事项 玻片、试管都要标记！！！A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清。 所用玻片、试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。 红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面， 一般先加血清，再加红细胞悬液，便于核实是否漏加血清。 离心时间、速度严格要求。 要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度，有助于A、B亚型的发现，观察后立即记录。 盐水试验法 白蛋白介质法 低离子强度介质法（LISS） 酶技术 抗球蛋白试验 聚凝胺促凝技术 PEG促凝技术 结果判读 加入抗球蛋白试剂后，如红细胞出现凝集或溶血，则结果为阳性。 加入抗球蛋白试剂后结果为阴性，而加入直抗阳性对照细胞后呈阳性反应，则结果为阴性。如加入直抗阳性对照细胞后呈阴性反应，则结果不可靠，必须重复检测。 操作步骤 ABO血型鉴定 不规则抗体筛选 玻片法（正定型） 试管法 （正定型,反定型） 盐水法 聚凝胺法 抗人球法 DiaMed 卡法结果判读 4＋ 在凝胶柱顶端形成单一层凝集细胞。 3＋ 凝集层主要位于凝胶柱上1/3。 2＋ 凝集位于整个凝胶柱，底部仅有较少细胞。 1＋凝集层位于凝胶柱下1/3。 凝胶中细胞没有凝集或溶血视为阴性。 思考题 1.红细胞ABO血型鉴定正反定型不一致原因 2.导致Rh血型鉴定出现假阳性和假阴性原因 3.抗体筛选的临床意义 结果判读 如果30秒内凝集解散，代表是凝聚胺引起的非特异性凝集，配血结果相合； 如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血实验不相合。 如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。 思考题 1.交叉配血试验中的影响因素 2.出现交叉配血不合的可能原因 目的 掌握交叉配血的试验方法 原理 盐水法 检查供受者之间有无ABO血型不合。用于抗体筛选阴性和不同血型骨髓移植患者的输血。 原理 凝聚胺法 凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间的距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则凝集不可逆。离心后，加入重悬液，凝聚胺的凝聚作用可通过加入枸橼酸钠而中和，使正常红细胞的凝聚解散，而抗体引起的凝集仍然存在。 试剂 抗A/抗B 标准血清 A1/B反定型细胞 献血者血清或血浆以及5%红细胞悬液 受检者血清或血浆以及5%红细胞悬液 BASO polymatching 试剂盒 标本：抗凝静脉血（EDTA-K2） 操作步骤（盐水法） 标记为主侧的试管中加入受者血清或血浆2滴和供者红细胞悬液1滴。 标记为次侧的试管中加入供者血清或血浆2滴和受者红细胞悬液1滴。 混匀，立即1000g离心1分钟。 检查是否溶血，轻轻摇动试管检查凝集。 复查献血员ABO血型，患者ABO/Rh血型。 判断并记录结果。 操作步骤（凝聚胺法） 取试管2支，标记主次侧 在主侧管中加入病人血清或血浆2滴，加供血者5%红细胞悬液1滴。 次侧管加供血者血清或血浆2滴，加入病人5%红细胞悬液1滴。 各加LIM液0.7ml，混匀，再各加polybrene(凝聚胺)溶液 2滴，并混合均匀。 操作步骤（凝聚胺法） 3400rpm离心10秒，倒掉上清液，管底残留约0.1ml液体。 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。 最后加入悬浮液（Resuspending） 2滴，轻轻转动试管混合并观察结果。 实验内容 血型鉴定 抗体筛选 交叉配血 目的 掌握红细胞ABO血型及Rh血型鉴定 原理 ABO血型鉴定：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A及抗B，可以将血型分为A型、B型、AB型、O型四种，利用红细胞凝集实验通过正定型、反定型准确鉴定ABO血型。 Rh血型鉴定： IgM型盐水抗D试剂能够与D阳性红细胞在盐水介质中形成肉眼可见的凝集。 原理 试剂 抗A及抗B血清（商品试剂） 5% A型和B型红细胞（试管法） 10% A型和B型红细胞（玻片法） IgM型盐水抗D试剂 标本 抗凝静脉血 EDTA-K2 红细胞ABO血型鉴定（试管法正定型） 标记两支干净的试管-A和-B 在标记为-A的试管中加1滴抗A试剂。 在标记为-B的试管中加1滴抗B试剂。 在每个试管中各加入5%受检者红细胞悬液 (1份压积红细胞+19份