第7章-吸光光度民法621.pptVIP

分析化学 §7 吸光光度法Spectrophotometry 基本内容和重点要求 掌握物质对光的选择性吸收、吸光度和透光度、朗伯—比耳定律及摩尔吸光系数等知识； 了解分光光度法的特点、基本原理、仪器构造和各部件的作用； 学习显色反应和显色条件的选择； 理解分光光度法定量分析中的各种影响因素。 §7-1 紫外-可见吸光光度法概论 一、方法依据及分类 二、方法特点 三、光的基本性质 四、物质对光的选择性吸收 一、方法依据及特点 基于物质对紫外-可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法(比色法、可见分光光度法及紫外分光光度法）。 灵敏度高、选择性好 可测10-3-10-6mol·L-1 准确度较高 相对误差为2%~5%，满足微量分析要求 应用广泛 可测定大多数无机物质及具有共轭双键的有机 化合物。 仪器简单、操作简便、分析快速 一般不分离干扰物质就能测定 二、物质对光的选择性吸收 单色光：具有同一波长的光 复合光：不同波长组成的光 可见光的波长大约在400～760nm之间，由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种色光按一定比例混合而成，各种光具有一定的波长范围。 互补色光 如果把适当颜色的两种色光按一定强度比例混合，可以组成白光，这两种色光称为互补色光，两种颜色互为补色。 物质颜色和吸收颜色的关系 表7-1 物质颜色和吸收光颜色的关系 光吸收曲线（可用实验方法确定） 7-2 光的吸收定律—朗伯－比耳定律 透光率与吸光度 朗伯－比耳定律 吸光系数、摩尔吸光系数 吸光度的加合性 1. 透光度T与吸光度A Transmittance and Absorptivity 2. 朗伯—比耳定律 Lambert-Beer’s Law 朗伯定律 A=lg – = k′b (c 一定时） 比尔定律 A=lg – = k′′c (b 一定时） 吸光系数、摩尔吸光系数 吸光系数a： 摩尔吸光系数?：是吸光物质的吸光能力的量度 (?大灵敏度高) 关系： ? ＝ M a 朗伯—比耳定律适用条件 有色稀溶液、均匀,非散射的吸光物质 (气体和固体) 入射光为垂直照射的平行单色光 吸光物质间无相互作用 被测物质不存在荧光或光化学现象 3. 吸光度的加合性 多组分体系中(各吸光物质无相互作用) 7-3 偏离朗伯－比耳定律的原因 标准曲线（校正曲线） 非单色光引起的偏离 化学因素引起的偏离 介质不均匀引起的偏离 1. 标准曲线（校正曲线） Standard curve，calibrated curve，working curve 2.偏离比尔定律的原因 （1）比尔定律的局限性 此定律只适用于稀 溶液（假设吸收离子之间无相互作用）。 高浓度时，粒子间的距离缩小，相互作用力增大，改变粒子对光的吸收能力，使 A 与 C 之间的线性关系发生偏离。 （2） 非单色光引起的偏离 目前各种分光光度计得到的入射光实际上都是具有某一波段的复合光，物质对不同波长光的吸收程度的不同，因而导致对朗伯－比耳定律的偏离（仪器条件限制）。 克服非单色光引起的偏离的措施： 使用比较好的单色器； 入射光波长选择在被测物质的最大吸收处（灵敏度最高，线性关系最好）； 测定时应选择适当的浓度范围。 （3）化学因素引起的偏离 溶液中的吸光物质常因解离、络合、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化而改变其浓度，因而导致偏离朗伯—比耳定律。 在分析测定中，要控制溶液的条件，使被测组分以一种形式存在，以克服化学因素所引起的对朗伯－比耳定律的偏离。 Cr2O72- + H2O 2HCrO42- 2CrO42-+H+ 4. 介质不均匀引起的偏离 溶液不均匀时，入射光通过溶液后，有一部分因散射现象而损失，使透射比减少，实测吸光度增加，使标准曲线偏离直线向吸光度轴弯曲（正偏离）。 在光度法中应避免溶液产生胶体或混浊。 分光光度计及其基本部件 一、基本部件及性能 光源 单色器 吸收池 检测系统 读数指示器 1. 光 源 在可见光和近红外光区，常用钨灯或碘钨灯作光源，它们辐射360－1100nm波长的光（要求：光源发出所需波长范围内的连续光谱具有足够的光强度，并稳定）； 在近紫外区，常使用氢灯或氘灯，它们能辐射180－375nm波长的光。 2. 单色器 由色散元件（将光源发出的连续光谱分解为单色光的元件）、入射狭缝、出射狭缝和准射镜组成。常用的色散元件：棱镜或光栅。 棱镜：用光学玻璃或石英制成，光通过棱镜发生折射而色散，按波长顺序将复合光分解为单色光。 光栅－光通过光栅发生衍射和干涉现象而分光。