光谱法探究螯合剂对人血清白蛋白中络合铜影响.pdfVIP

维普资讯 JlJ西大学学报 (自然科学版)13(2)#185—190，1990 Journa|ofShanxlUniversity (Nat．Sci．Ed．) 光谱法研究螯合剂对人血 清 白蛋 白中络合铜的影响 马贵赋 杨 频 (山两大学化学系，分予所) 摘要 本文在溶液中研究了人血清白蛋 白和铜络台物的吸收光谱．观察了整合剂EDTA~ 人血清 白蛋白中络台铜的行为。基于DSCPCF~位场模坪对吸收光滑作了理论解析。 关t调 自蛋 白j整台_剂，吸收光渚 ’ 铜是人体必需的微量元素，正常成 年 人 体 rf1铜 的含 量 为50—120mg。Kinnca wilson报道了发现一种遗传性疾病，此病 由于铜的正常代谢作甩遭到破坏，引起金属在 组织中沉积面引起的。此病的症状可 通过促排过量的铜而得到缨解 。血清 白蛋 白是由 585个氮基酸残基组成的单肽链蛋 自质，是血浆的主要成分。自蛋 白是铜的运 载 体，分 子 内有铜的结合部位。本文观测了血清 白蛋 自和铜络合物的光谱及螯台剂EDTA对键合 铜的影响，并应用配位场理论分别对d—d跃迁谱作了理论解析。 1 材料和方法 吸收光谱仪： 日本岛津UV一365型单光束紫外一可见、近红外分光光度仪。 微量进样器：上海 医疗激光仪器厂。 人血清 自蛋 白：生化试剂 CE生部上海生化制品研究所)，纯度犬 于95％，其余主 要 为水。浓度 由分析天平称量 由Meloun[1)渊定的分子量计算而得。 其它试剂均为分析纯。 光谱测定方法：配制自蛋 自和铜离子l：1、1：2和l：4的水溶渡，在uV一065型 分光 光度仪上，lcm吸收池，测定其吸收光谱。酸度对人血清 白蛋自中镝的影晌，配 制人血 清 白蛋 自和铜1：4的水溶液，在仪器上一边测定pH值 (用PH试纸)，一边记录吸 收光 谱 。螯合剂的作用，一边用微量进样器加入，一边记录其吸收光谱 2 结果和讨论 2．1 人血清 白蛋白中锕离子结合位置 1989．05．O7收刊 。 ·lB5 · 维普资讯 徒们分别配制J一人血清 自爱白 铜离予比为1：l、1：2 1：1的球溶液，观察了其吸 收光谱 (如图1)。fl1l罔可见j】i现 r两个吸收蜂，第一个吸收峰最大吸收在505nm，第 ：=个吸收蟓椰 10nm，并且随着加入姻铜离子 比剑增大，6lOmn的吸收峰迅 速增强。由 此可见铜离子在人血清 白蛋 白巾至少存在两类铜离于自0结合 位置 。Show．j留一。)用二甘 氯一L一组氯酸一N一 甲基模拟铜在人血清 白疆 自中曲成键位置，结果给出 的光谱类似 于位置I的光谱，从而确定了位置I的配位结构。随铜离子浓度增大 ，位置I饱和 后，则进 入第 Ⅱ结合位置 。由光 普蜂位差别可知两类铜的配位微 环境是不相 同的 同1 人血清 白血 白和铜维台物 的吸收光请 HSA浓度2．0×10 M ．镉离子 It2．0X10一M I 4．0×101。M I：8．0×10 M 2．2 露度对人血清 白蛋 白结合铜的影响 逐渐改变几血清白蛋 白与锕络台物溶液的酸度，观察吸收峰的变 。结果表明，酸 蜃增强对，结合位置 I的蜂首先消失，移至G2~3nm处，并且逐渐红移。说明结合位置 I 对酸度非常敏感。但降低酸度吸收蜂逐渐复原．两结合位置特征峰出现 表 明了白蛋 白 结合锕的可逆性，与文献 ]报道的内蛋 白可作为可逆惫属离子络合剂结论一致，为 白蛋 白在人体 内作为金属离子运载蛋 白提供 了又～次实验证据，结果见 2图。 陶。酸晕对人 清白蛋白结台铜离子的影响 a：酸度辟倩∞光祷变化 b；酸度增大的光谱变亿 ·l86 t