响应面法优化乳酸乳球菌电转化效率研究.PDFVIP

上  海  理  工  大  学  学  报 第 40 卷     第 6 期 J. University of Shanghai for Science and Technology Vol. 40    No. 6    2018   文章编号：1007 − 6735(2018)06 − 0566 − 06 DOI: 10.13255/ki.jusst.2018.06.009 响应面法优化乳酸乳球菌电转化效率研究 1 2 1 3 4 1 韦云莹 ，    王立峰 ，    熊智强 ，    王世杰 ，    赵林森 ，    艾连中 （1. 上海理工大学 医疗器械与食品学院，上海 200093；2. 南京财经大学 食品科学与工程学院，南京 210046； 3. 石家庄君乐宝乳业有限公司，石家庄 050221；4. 河北一然生物科技有限公司，石家庄 050800） 摘要：乳酸乳球菌 NZ9000是乳酸菌食品级高效蛋白表达系统中使用最广泛的宿主菌株。为获得高 效的电转化效率，首先采用单因素试验，对影响 NZ9000 电转化效率的各因素：生长阶段、甘氨酸 浓度、质粒浓度、电场强度、复苏培养和复苏时间进行优化；然后利用响应面法对其中的关键因素 进一步优化，确定最佳电转化条件为吸光值 OD  0.2，甘氨酸浓度 8 g/L和电场强度 12.5 kV/cm， 600 7 电转化效率达到 3.76×10 CFU/μg DNA，比优化前提高了 250%。本研究通过优化乳酸乳球菌 NZ9000感受态的制备方法，提高了电转化效率，为深入挖掘乳酸乳球菌感受态潜力奠定了基础。 关键词：乳酸乳球菌；响应面法；电转化 中图分类号：Q 785            文献标志码：A Optimization of Electroporation Efficiency of Lactococcus Lactis Using Response Surface Methodology 1 2 1 3 4 1 WEI Yunying ， WANG Lifeng ， XIONG Zhiqiang ， WANG Shijie ， ZHAO Linsen ， AI Lianzhong (1. School of Medical Instrument and Food Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China; 2. College of Food Science and Engineering, Nanjing University of Finance and Economics, Nanjing 210049, China; 3. Shijiazhuang Junlebao Dairy Co., Ltd., Shijiazhuang 050211, China;