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第三章病毒和亚病毒——微生物学(我周德庆主编)
* * 第三章 病毒和亚病毒 了解病毒的特点和定义;病毒的结构、病毒大小、化学组成、病毒的寄主和种类以及病毒的群体形态特征。掌握病毒的一般增殖过程。掌握噬菌体、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源噬菌体的概念,认识和掌握噬菌体的结构、特点和功能;烈性噬菌体的增殖与溶菌;温和噬菌体与溶源性细菌的特点;噬菌体的效价和一步生长曲线;噬菌体的危害与防治措施。了解什么是亚病毒?亚病毒包括的类病毒、拟病毒、朊病毒等的特性。 非细胞生物 (真)病毒:至少含有核酸和蛋白质两种组分 亚病毒 类病毒:只含具单独侵染性的RNA组分 拟病毒:只含不具侵染性的RNA组分 朊病毒:只含蛋白质一种组分 一、概述 (一)什么是病毒? 病毒是超显微的,无细胞结构,专性活细胞内寄生,在活细胞外具一般化学大分子特征,一旦进入宿主细胞又具有生命特征。 (二)特点: 1、形体十分微小,能通过细菌滤器,电镜可见; 2、无细胞结构,分子生物,由核酸和蛋白组成,且一种病毒仅含一种类型核酸; 3、专性活细胞内寄生,有宿主专一性,无独立代谢酶系,依赖宿主自身复制; 4、对抗生素不敏感,对干扰素敏感。 (三)种类 1、微生物病毒:侵染细菌、放线菌等原核微生物的病毒,通常称为噬菌体。 2、植物病毒: 3、脊椎动物病毒: 4、昆虫病毒: 二、形态大小 (一)大小 个体极小,能通过细菌滤器,必须通过电镜观察,测量单位为nm, 多在100nm左右。 (二)形态 1、个体形态——病毒粒子的形态 病毒粒子是指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。 一般为球状、棒杆状、蝌蚪状和线状等多种形态。 人、动物和真菌的病毒大多呈球状,少数为弹状或砖状。植物病毒和昆虫病毒则多数为线状和杆状,少数为球状。噬菌体,部分呈蝌蚪状,部分线状或球状。 2、群体形态 (1)包涵体 包涵体是病毒感染细胞后,宿主细胞内形成的一种在光学显微镜下可见的蛋白质小体。多为圆形、卵圆形或不定形,在细胞中呈现的大小数量不一,多数位于细胞质内(质型多角体),少数位于细胞核内(核型多角体 ),也有的在细胞质和细胞核内都存在。 应用: a.用于病毒病的辅助诊断; b.用于生物防治。 (2) 噬菌斑 1) 什么是噬菌斑? 当一个噬菌体感染一个敏感细胞后,隔不久即释放出一群子代噬菌体,在固体培养基中,它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞,并引起它们的裂解,如此经过多次重复,就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体—噬菌斑,它是透亮不长菌的小圆斑,每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。 2) 噬菌斑的应用: a. 作为噬菌体的鉴定指标。 b.用于纯种分离。 c.计数——噬菌体效价的测定 效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数,也即噬菌斑形成单位(pfu)。 噬菌斑×稀释倍数 噬菌体效价= 裂解液毫升数 双层平板法的优点: ①弥补了原来底面不平的玻璃皿的缺陷; ②每一噬菌班的大小接近、边缘清晰,且不致发生上下噬菌斑的重叠现象; ③有利于计数。 双层平板法 (3) 空斑和病斑 在覆盖一薄层琼脂的一片单层细胞上,如某一细胞感染有病毒,则增殖后的病毒粒子只能扩散至邻近细胞,最终形成与噬菌斑相似的空斑。利用病毒空斑可对有活性的动物病毒粒子进行计数。 而病斑则是单层细胞受肿瘤病毒感染后,导致细胞剧增,形成类似与菌落的病灶。 (4) 枯斑 指植物叶片上的植物病毒群体。 三、病毒的结构与化学组成 (一)病毒粒子的构造与化学组成 1、化学组成 多数病毒只含蛋白质和核酸两种成分。少数大型病毒还含有脂类和糖类。 (1)核酸 功能:遗传物质基础。 1)核酸种类: 病毒只含一类核酸——DNA或RNA。含DNA的病毒称为DNA病毒,含RNA的病毒称为RNA病毒。 2)单链(ss)和双链(ds): RNA病毒多数是单链,极少数为双链,DNA病毒多数为双链,少数为单链。 3)线状和环状: 4)正链和负链 凡碱基排列顺序与mRNA相同的单链DNA或RNA,称(+)DNA链或(+)RNA链,凡碱基排列顺序与mRNA互补的单链DNA和RNA,称(-)DNA?链或(-)RNA链。 正链(+)核酸具有侵染性,负链(-)没有侵染性。 5)核酸分段现象 :每个节段都有自己独特的核苷酸序列,分别转录一种蛋白质。 6)核酸含量:随病毒种类而异,通常在1%~50%之间。 (2) 蛋白质 病毒
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