饲料淀粉糊化度-美国大豆出口协会.PDF

饲料淀粉糊化度(熟化度)的测定1 DETERMINATION OF STARCH GELATINIZATION (COOKING DEGREE) IN FEED 熊易强 博士，美国大豆协会 前 言 本文介绍的是目前美国饲料工业界普遍采用的测定淀粉饲料热 加工程度的方法。此方法实际上是已发表过的测定淀粉糊化度的经典 酶解法的简化。该经典酶解法测定淀粉糊化度是将未加工的“生”淀 粉(或含淀粉的饲料样品)在给定实验条件下的葡萄糖释放量定为零， 将充分煮熟的全糊化淀粉(或与上述含淀粉饲料同一来源的全糊化样 品) 的葡萄糖释放量定为100，以不同比例的“生样品”与“全糊化样 品”的混合物与对应的葡萄糖释放量建立直线回归；测定同一来源的 加工过的样品的葡萄糖释放量，根据回归公式，推算加工样品的糊化 度(见另文：测定高粱的加工程度和淀粉可利用率的改进酶法，熊易 强,S.J.Bartle,R.L.Preston,1990) 。该经典方法在商业应用上有两个问 题：一是测定手续繁琐，费工耗时；二是生产中往往难以得到与所测 样品同一来源的未经加工的“生”淀粉(或饲料)样品。作者在美国饲 料部门工作期间，吸取生产单位的检测经验并加以改进，建立了本文 所介绍的简化方法，也是目前工业上采用的简化方法。此法是以加工 过的样品的葡萄糖释放量与同一来源的全熟化样品的葡萄糖释放量 之比值来直接表达淀粉糊化(熟化)度。更确切地讲，该比值所表达的 是在给定实验条件下淀粉酶解的有效率(度) 。这一推算和表达方式不 仅省去了测定“生”样品葡萄糖释放量(对一般谷物来说，该数值为 淀粉含量的 20—30%)及建立回归公式的步骤；而且，在不需要得知 样品的葡萄糖释放量和样品的淀粉含量的情况下，可以直接用光吸收 的比值表达糊化(熟化)度，从而进一步省去了建立葡萄糖标准曲线的 步骤。需要指出的是，简化法所表达的淀粉糊化度，由于“零点”位 置的改变，与经典方法在概念和数值上都有所差别。但从动物对淀粉 1 首次发表于1999 年3 月 239 的利用率的角度来说，这一简化方法应该说是更有意义、更为直接的 表达。　 设 备 天平，灵敏度0.001g 。　 恒温水浴。　 分光光度计。　　 试 剂 缓冲液 将３.7ml 冰醋酸(glacial acetic acid)和4.1g 无水乙酸钠(anhydrous sodium acetate)(或6.8g NaC H O ·3H O)溶于大致100ml 蒸馏水中， 2 3 2 2 定容至1 立升，必要时可滴加乙酸或乙酸钠调整pH 值至4.5 ±0.05 。 　 酶溶液 将750mg 脱支酶(amyloglucosidase,Sigma,No.A-7255 ，浓度12100 单位/g)溶于 50ml 蒸馏水。此溶液含粗制酶 15mg(或 180 单位/ml) 。 测试当天配制。　 蛋白沉淀剂 1. ZnSO ·7H O,10%(w/v)蒸馏水溶液。　 4 2 2. 0.5N NaOH 。　 铜试剂 将40g 无水Na2CO3 溶于大致400ml 蒸馏水中，加 7.5g 酒石酸 (tartaric acid),溶解后加4.5g CuSO ·5H O 。混合并稀释至1 立升。　 4 2 磷钼酸试剂 取70g 钼酸(molybdic acid)和10g 钨酸钠(sodium tungstate) ，加入 400ml 10%NaOH 和400ml 蒸馏水。煮沸20—40min 以驱赶NH3 。冷 却，加蒸馏水至大约 700ml,加 250ml 浓的正磷酸(85%H PO ) ，用蒸