2.病理组织的取材、保存与送检讲义解析.ppt

一、概述 ⑶ 固定液的量：10倍于组织的体积。 ⑷ 固定的时间：数小时～24小时，不同种类不一样（固定液种类、组织大小……） ⑸ 固定温度：常温20～25℃，低温4℃时间要延长。 ⑹ 固定用容器：玻璃容器为好，禁用金属容器，底部最好垫纱布或棉花，防组织贴壁而固定不良。 常见毒物中毒的样品采取表 * * * * 病料的采集、保存与送检 （二）确采集、保存与送检病料的重要性 （三）病料的采集、保存与送检三者之间的关系 （一）病料的含义 （一）病料的含义 狭义：用于疾病诊断的材料。 广义：用于动物科学研究、实验等各方面的实验室检查材料。如：动物研究中的重要内容——形态学和生理机能的变化。涉及到病理学、组织胚胎、药物毒理、动物营养、动物生化、生化等学科 （二）正确采集、保存与送检病料的重要性 1.关系到疾病诊断的准确性：病变材料反应了疾病 的本质变化。 2.关系到科研和实验结果正确与否： 科研试验：设计 实施 结果。 实施（实验） 的过程 获取数据 动物 形态变 化、机能（生理生化指标）。 （三）病料的采集、保存与送检三者之间的关系 ???? 1. 正确的采集病料是获得正确结果的关键。 ????? ?2. 正确的保存病料是获得正确结果的保证。 ????? 3. 正确的送检病料是获得正确结果的必要条件。 ※ 三者均能影响结果！！！ 二、实用举例 （一）用于病理组织学检查病料的采集、 保存与送检 （二）微生物学检查的材料的采集、保存 与送检 (三)用于毒物分析材料的收集保存与送检 （一）用于病理组织学检查病料的采 集、保存与送检 1. 病料的采集（取材） 2. 病料的保存（固定） 3. 病料的送检 病料的采集（取材） ⑴ 取材应目的准确，有病变的组织必须取，有疑问处重点取，变化不明现时全面取。 ⑵ 取材部位要准确，所取组织块应含有病变、正常和两者相交过度结构;组织结构要完整,如肠（外膜层、肌层、粘膜层）、肾（皮质、髓质）。 ⑶ 取材时间尽量早。病死动物夏季不超过6h，冬季不超过24h。（相对） ⑷ 取材大小及数量。一般1.5×2.0×0.3～0.5cm为好，不同的变化均取。 ⑸ 特殊组织取材? ?壁薄的囊腔脏器（肠、胆囊）。 体积微小的组织（小鼠的肾上腺、垂体、 甲状腺等）。 液状病料、渗出液。 柔软与变形的组织（肠系膜、神经干）。 ⑹ 防人为变化：取材刀具要快，动作要轻，防挤压。 2. 病料的保存（固定） ⑴ 固定的作用：使细胞内的物质尽量接近生活状态时的形态，结构和位置，并便于切片和观察。 ⑵ 固定液的选择：用于组织固定的固定液种类繁多，根据切片观察的目的而定（形态结构、组织内抗原、组织内脂肪、糖原） ※ 固定方法： ⑴浸泡法：要固定的组织浸入固定液中，是最常用的 方法。 ⑵注射、灌流固定法：用于体积过大，固定液 又难 进入肉尸的组织或整个器官、动物体进行固定。 ※电镜取材 活体固定 ※眼球固定 ※动物整体浸渍标本制作 ⑶蒸气固定法：固定组织中的可溶性物质，甲醛或锇 酸固定。 石蜡切片常用固定液 ⑴ 10％福尔马林固定液 甲醛溶液 1份 自来水 9份 ⑵ 10％中性福尔马林固定液（PH 7.0） 甲醛溶液 120ml NaH2PO4·H2O 4g Na2HPO4 13g 蒸 馏 水 880ml ⑶ 4％多聚甲醛固定液（用于免疫组织化学） 多聚甲醛 4g 0.1mol/L PB （PH 7.4） 100ml ※多聚甲醛＋PB，于磁力搅拌器上，加热到60℃左右完全溶解，溶液变清（有时需加几滴1mol/L NaOH ） ， 最后PB补足至100ml。 ⑷ Bouin氏固定液（用于组织学和免疫组织化学固定） 苦味酸饱和水溶液 75ml 甲醛 25ml 冰醋酸 5ml ⑸ Carnoy氏固定液（使用于染色体、DNA、RN