龙眼、荔枝都胚性培养物超低温保存研究1.docx

福建衣林大学博士学位论文 福建衣林大学博士学位论文 龙眼．荔枝胚挂培养物起低温保存研究 辅要 摘 要 龙眼、荔枝同属无患子科，是我们南方重要热带亚热带特产果树．本研究以 龙眼、荔枝胚性培养物为材料，进行龙眼、荔枝玻璃化超低温保存方法研究：同 时，以龙眼胚性培养物为材料，进行超低温保存过程中低温预培养的蛋白质组学 研究，以进一步探索超低温保存机理。主要研究结果如下： 1．龙眼、荔枝胚性培养物的玻璃化超低温保存技术体系 以龙眼胚性培养物为供试材料，探讨继代培养时间、化冻方式、不同发育阶 段低温预培养对龙眼胚性培养物玻璃化超低温保存的影响。试验结果表明，继代 培养12_15 d的龙眼胚性愈伤组织用于玻璃化超低温保存，可获得较高的细胞活 力；40℃温水浴、25℃左右室温和自来水冲洗3种不同的化冻方式对龙眼胚性 愈伤组织玻璃化超低温保存后的存活率影响差异不大{球形胚玻璃化超低温保存 后的细胞活力，比正常的胚性愈伤组织玻璃化超低温保存后的细胞活力高． 以荔枝胚性愈伤组织为供试材料，探讨低温预培养、化冻方式以及光照条件 对荔枝胚性愈伤组织玻璃化超低温保存的影响．结果表明荔枝胚性愈伤组织5℃ 低温预培养2 d再进行超低温保存，采用加℃温水浴化冻和自来水流水冲洗化 冻都能明显提高保存后的细胞活力；超低温保存后的培养物置于黑暗中进行为期 15