感染性疾病检查处理方法.pptVIP

2．PCR 3. 生物芯片技术? 核酸检测结果评价 检测病原体微生物最灵敏的方法 早期诊断 现症感染 假阳性与假阴性 （五）细菌毒素的检测 1. 内毒素的测定 常用方法：鲎试验（limulus tests）  内毒素与鲎试剂接触时，可激活凝固酶原，使可溶 性的凝固蛋白原变成凝胶状态的凝固蛋白 内毒素 (鲎试剂 ) 凝固酶原 凝固酶 凝固蛋白原 凝固蛋白(凝胶) 2. 外毒素的测定 （1）体内毒力试验 细菌外毒素对机体的毒性作用，可被相应抗毒素中和，若先给动物注射抗毒素，然后再注射外毒素，则动物不产生中毒症状。 （2）体外毒力试验 以细菌外毒素的特异性免疫血清为抗体与被检细菌外毒素(抗原)进行抗原抗体反应，来检测外毒素，从而鉴定细菌是否产生该种毒素。 白喉棒状杆菌的Elek平板毒力测定 （３) 免疫学方法：如ELISA法 葡萄球菌肠毒素、肠产毒型大肠埃希菌LT及ST等的测定 （4）分子技术 (六）体外抗菌药物敏感试验 常用方法 纸片扩散法（Kirby-Bauer test） 稀释法（dilution test） E试验法（E test） 杀菌试验 体外联合药物敏感试验 检测程序 感染性疾病实验室诊断 Laboratory Diagnosis of Infectious Diseases 一般实验检测 病原学检测 WBC常规检查 直接显微镜检查 C-反应蛋白（CRP） 分离培养和鉴定 血清降钙素原（PCT） 病原体核酸检测 体温 病原体抗原与抗体检测 代谢产物毒素等检测 体外抗菌药物敏感试验 （一）直接显微镜检查（形态与结构检查） 1. 染色标本检查法 了解病原体的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体 2.不染色标本 检查生活状态下细菌的动力及运动状况 3. 直接电镜检测EM 免疫电镜技术IEM HAV particles found in fecal extracts by immunoelectron microscopy 高倍暗视野显微镜下悬滴米泔样粪便，观察到来回穿梭似流星样运动的细菌 （二）分离培养和鉴定 分离培养是微生物学诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术 临床意义： 1.明确感染病原体 2.为临床提供体外抗微生物药物敏 感试验结果 药物敏感试验 培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 毒力试验 1. 细菌的分离培养和鉴定 一）病毒分离培养 1．动物接种 2.病毒的分离与鉴定 2．鸡胚培养 卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种 尿囊接种及羊膜腔接种 敏感动物合适部位 3．组织细胞培养： 目前培养病毒应用最广的方法 （1）原代和次代细胞培养 （2）二倍体细胞培养 （3）传代细胞培养 识别病毒在培养细胞中增殖 病毒在培养细胞中增殖的指标 1）细胞病变: 细胞病变效应（CPE）、包涵体 2）红细胞吸附（hemadsorption） 细胞病变效应（CPE）： 病毒感染细胞后引起的细胞病变，可出现细胞圆缩、裂解或细胞 肿大、数个细胞融合成多核巨细胞等。 二）病毒鉴定 Cytopathic effect (CPE) of primary severe acute respiratory syndrome–associated coronavirus strain 48h 72h 36h N 常用鉴定试验：中和实验 virus 常用鉴定试验：血凝抑制实验 红细胞凝集抑制（HI）试验 原理： 病毒 病毒（特异性抗体） + + 红细胞 红细胞 凝集 不凝集 血凝现象 血凝抑制现象