抗磷脂综合征 (APS).pptVIP

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2019-01-17 发布于浙江
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抗磷脂综合征 (APS).ppt

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抗磷脂抗体检测抗磷脂抗体实验方法抗磷脂抗体欧洲论坛 ?目标 = 使抗磷脂抗体实验标准化 ? 建议 : 定标物质控物含有单克隆抗体可统一结果报告单位 (eg. MAU/GAU; MPL/GPL) 双次测试标本每一实验室至少检测50个正常血浆标本计算阈值 (计算百分比) ? 期望的是什么 ? 国产和一些商业试剂盒的差异小每一试剂盒包含: 质控物定标物 = 单克隆抗体（人/鼠单克隆抗体) 符合国际组织推荐标准可接受 : 批间差标准化报告结果使用统一的单位 (defined/MAbs) 符合国际组织推荐标准报告结果单位统一 (国产和一些商业试剂 :结果用OD值表示）高特异性为避免非特异结合采用山羊血清作为标本稀释液 TMB (四甲基联苯胺) 液体, 直接使用稳定, 可用于 ELISA方法的全自动检测仪无毒性 (? OPD) 血浆标本所有新抗磷脂抗体试剂盒需要血浆标本稀释比例均为 (1:101) 抗心磷脂抗体 (aCL) - 实验室间由于采用不同的试剂和检测方法导致抗心磷脂抗体结果差异较大. - 阈值,定标和方法不同是引起结果差别的主要原因. - 我们注意到抗心磷脂抗体 IgM 有假阳性结果. - 2002年 ISTH-SSC 建议用抗-b2GP1实验和狼疮抗凝物实验替代抗心磷脂抗体实验 Krillis et al, in press Krillis et al, in press 抗-b2GP1 抗体 - 检测抗-b2GP1抗体比检测抗心磷脂抗体诊断抗磷脂综合征特异性更高. - 在抗磷脂综合征确诊病人中, 有3-10%仅抗-b2GP1抗体实验阳性. 当前APA检测的弱点使用国产试剂盒 - 重复性差 - 准确度低 - 缺乏统一标准抗磷脂抗体实验方法抗磷脂抗体欧洲论坛 ? Asserachrom? APA Screen (ref. 00266) 定性检测 APA (IgG, IgM IgA) ? Asserachrom? APA IgG,M (ref. 00267) 定量检测 APA (IgG and/or IgM) 新 Asserachrom? 抗磷脂抗体系列产品 ? Asserachrom? Anti-b2GP1 IgG (ref. 00268)* 定量检测 anti-b2GP1 抗体 (IgG) ? Asserachrom? Anti-b2GP1 IgM (ref. 00269)* 定量检测 anti-b2GP1抗体 (IgM) Asserachrom? Anti-Prothrombin IgG,M (ref. 00265)* 定量检测 anti-prothrombin 抗体(IgG and/or IgM) * 仅用于科研 cardiolipin phosphatidylserine phosphatidic acid b2GP1 1/ TMB + wait for 5 min. 2/ H2SO4 sample dil. 1:101 30 min. room temp. + wash (5X) anti-human IgG,M,(A) coupled with peroxidase 30 min. room temp. + wash (5X) read at 450 nm APA Asserachrom? APA Screen Asserachrom? APA IgG, M human b2GP1 1/ TMB + wait for 5 min. 2/ H2SO4 sample dil. 1:101 1 hour room temp. + wash (5X) anti-human IgG or IgM coupled with peroxidase 1 hour room temp. + wash (5X) read at 450 nm anti-b2GP1 Asserachrom? Anti-b2GP1 IgG Asserachrom? Anti-b2GP1 IgM Asserachrom? Anti-Prothrombin IgG,M human prothrombin 1/ TMB + wait for 5 min. 2/ H2SO4 sample dil. 1:101 1 hour room temp. + wash (5X) anti-human IgG or IgM coupled with peroxidase 1 hour room temp. + wash (5