采用Red重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因-新桥医院.PDFVIP

下载本文档

7
0
约5.72万字
约 5页
2019-02-04 发布于天津
举报
版权申诉

采用Red重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因-新桥医院.PDF

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

采用Red重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因-新桥医院

　中国人兽共患病学报，（）１２９２０１３２９２ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｏｏｎｏｓｅｓ　　　：／ＤＯＩ１０．３９６９ｃｚ．．ｉｓｓｎ．１００２－２６９４．２０１３．０２．００５ｊｊ采用Ｒｅｄ重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因，，，，，，余华熊浚智何晓梅盛哈蕾蔡文强谢玮张克斌　　：，。摘要目的敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因获得无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株方法采用ＰＣＲ从　　　，，ＫＤ４６质粒上扩增噬菌体的Ｒｅｄ重组酶基因并将其克隆到大肠杆菌和铜绿假单胞菌穿梭质粒ＵＣＰ多克隆位点上电击ｐ λ ｐ，／。、转化铜绿假单胞菌ＰＡＯ１感受态细胞构建ＰＡＯ１ＵＣＰＲｅｄ基因敲除体系常规基因操作构建两端与弹性蛋白酶基因上ｐ－，；／；下游同源中间为庆大霉素抗性基因的线性打靶片段并将其电击转化ＵＣＰＲｅｄＰＡＯ１感受态采用庆大霉素和羧苄青霉ｐ－；、，。素抗性平板初步筛选阳性重组菌通过ＰＣＲＲＴＰＣＲ及弹性蛋白酶活性检测方法鉴定菌株弹性蛋白酶基因的敲除情况－，。结果本研究通过构建Ｒｅｄ重组系统获得了无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株结论本研究成功敲除了铜绿假单　　，胞菌弹性蛋白酶基因所获无弹性蛋白酶活性的菌株将为系统深入研究弹性蛋白酶在铜绿假单胞菌致病性中的详细作用机理提供材料和基础。：；；；关键词铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因敲除Ｒｅｄ重组系统中图分类号：文献标识码：文章编号：（）Ｒ３７８Ａ１００２０２－０１２９－０４　　ＧｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆａＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｉｎｏｓａｅｌａｓｔａｓｅ　　　　ｇ　