e3泛素连接酶wwp2对rhoe的调节研究细胞生物学专业论文.docxVIP

CatalogueABSTRACT Catalogue ABSTRACT ．I 1．INTRoDUCTIoN 一1 1．1 Researching progress of Rnd3／RhoE ．．1 1．2 Researching progress of E3 ligase WWP2 ．13 2．MATERIAI S AND METHoDS 19 2．1 Materials ．．19 2．2 Methods ．23 3．RESULT AND ANAI．YSIS ．43 3．1 WWP2 direcdy interact with RhoE 43 3．2 WWP2 inhibits ubiquitination of RhoE． ． ． ．． ． ．． ．． ． ． ． ． ．．47 3．3 WWP2 regulates actin cytoskeleton 52 3．4 WWP2 enhances cell migration ．53 4．DISCUSSION AND PRoSPECTS 55 4．1 Further research ．． ．．55 4．2 Significance of this study ．57 5．REFERENCE ．．58 ACKNOWLEDGEMENTS ．66 万方数据 摘要RhoE，也被称为Rnd3，是Rho小G蛋白家族中Rnd亚类中的一员。目前 摘要 RhoE，也被称为Rnd3，是Rho小G蛋白家族中Rnd亚类中的一员。目前 RhoE己知的最主要功能是通过RhoA／Rock信号来影响细胞骨架的变化，细胞 迁移以及神经元极性的构建。此外，RhoE也在阻滞细胞周期、抑制细胞生长、 诱导细胞凋亡中发挥作用。越来越多的研究表明，RhoE表达水平的异常在某些 系统性疾病发生中发挥作用，尤其是凋亡心肌病，发育性心律失常及心力衰 竭，脑积水，肿瘤转移和化疗耐受性。因此，更好地理解RhoE的调控机制对 人类疾病的预测与治疗都有重要的意义。 WWP2是HECT E3泛素连接酶家族成员之一，其在肿瘤发生发展过程中 扮演着重要的角色。例如，WWP2多泛素化降解PTEN，增强Akt信号通路， 促进细胞增殖；WWP2也通过泛素化调控TGF．D信号通路中的Smad蛋白参与 到上皮间质转化与细胞周期阻滞过程。因此WWP2可以用作肿瘤预后标记，在 某些恶性肿瘤中可作为治疗靶点。 本论文的研究发现WWP2可通过HECT结构域与RhoE直接结合，并且通 过抑制R．hoE的泛素化来改变其蛋白稳定性，但这一过程并不依赖于WWP2的 E3泛素连接酶活性。WWP2通过上调R_hoE的蛋白水平，由此使细胞内肌动蛋 白纤维骨架解聚，增强了细胞的运动迁移能力。此外本文就WWP2改变RhoE 蛋白稳定性的可能机制做出了几种假设，为后续更深入研究WWP2非泛素连接 酶活性依赖性调控RhoE的机制提供了思路。 关键词：RhoE；WWP2 万方数据 Abstra Abstra ct RhoE，also known as Rnd3，is a member ofthe Rnd subclass ofthe Rho family of small GTP·binding proteins．The most important function of RhoE is to regulate cytoskeleton dynamics，cell migration and neuron polarity by RhoA／Rock signaling． RhoE also plays a critical role in arresting cell cycle，inhibiting cell growth，and inducing apoptosis．Increasing data have shown that aberrant RhoE expression may cause some systemic diseases；especially in apoptotic cardiomyopathy，developmental arrhythmogenesis and heart failure，hydrocephalus，tumor metastasis and chemotherapy resistance．Therefore，a better insight of the function and regulation of RhoE would be important for prediction and treatment of multiple human diseases． WWP2 is one of the HECT E3 ubi