中国猎蝽科昆虫分子分类的初探-昆虫学专业毕业论文.docx

摘 摘 要 文中概述了昆虫分子分类学的国内外研究历史、现状及其研究意义；简要介绍了PCR 技术及DNA序列分析方法；同时，还介绍了作为分子分类研究材料的线粒体DNA+ ， +(mitochondfial DNA，mtDNA)。一． 作者用方便快速的方法从猎蝽足中提取mtDNA，根据相关文献设计引物，PCR扩增 得到16S rRNA基因(16S rDNA)和细胞色素氧化酶亚基l基因(C01)，大小分别约为o．5kb 和0．4kb。将扩增的片段与克隆质粒载体pMDl8一T连接，转化到JMl09中，提质粒，用酶 切、PCR等方法鉴定，进行测序。用DNAMAN，DNASTAR和MEGA分析所测序列。 作者共得到来自6个甄科的14种昆虫的16S rDNA序列14个，COI序列1个，并作 了序列分析。艋16S rDNA序列中，最长的是红缘猛猎蝽(514bp)，最短的是红平腹猎蝽 (506bp)；A+T含量为67％--74％，平均含量为71．3％。厂、一 ， 对锥猎蝽属Triatoma昆虫的16S rDNA和COI序列分机跆果显示，这些昆虫的mtDNA 中A+T的含量较高，达到了70％。同源性分析表明，广锥猎蝽Triatoma rubrofasciata(De Geer)与其它锥猪蝽属Triatoma昆虫由于存在地理位置上的不同，它们的同源性也有差异。} 用几种系统发育分析方法对所有测到的16S rDNA序列进行了同源性分析，构建系统 进化树。结果表明，亚科间亲缘关系由近及远为：盗猪蝽亚科Peiratinae、猫蝽亚科 Reduviinae、飒猎蝽亚科Salyavatinae、锥猎蝽亚科Tdatominae、光猎蝽亚科Ectfichodinae， 其分类结果与形态分类系统所得出的结果有部分出入。，， 在讨论部分，分析这些序列同源性与地理分布之间的关系．同时，还提出了有待于进 一步探讨的问题。 、／? 、，，÷ 关键词： 16S rRNA基因(16S rDNA)；细胞色素氧化酶亚基I基茵(COD；系统发育分 析i同源性；猎蝽科。 ABSTRACTThe ABSTRACT The present paper is a thesis for the degree of M．S．．which deals witb the molecular systematics ofthe family Reduviidae from China． In this thesis，mitochondrial 16S ribosomal RNA gene(16S rDNA)and cytochrome oxidase subunit I gene(C01)from 14 species belonging to 6 subfamilies were cloned and sequenced． The segment of 16S rDNA is about 0．5kb in length and the segment of COI is about O．4kb in length．Phylogenetic analysis was carried out using DNAMAN，DNASTAR and MEGA． The longea length of 16S rDNA was 514bp in Sphedanoletes gularis，the shortest Was 506bp in Tapeinus fuscipennis．The level of A+T content was from 67％to 74％．and its average content WaS 7l-3％． Pairwise comparisons of the sequences of Triatoma spp．showed that base substitutions were biased toward A．T transversion．Both segments contain a relatively higll level of A+T level (70％)．This tendency in COl Was obvious in the third pos．tion of condons in which 73．5％of nucleotide were A or t Homology analysis showed that with the difference of the geography, there were differences in homoloby ofexamined Reduviids． A large varify of phylo