二烯丙基三硫醚肺损伤保护机制及其固体制剂的初步研究药物分析学专业论文.docxVIP

原创性声明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 拯莓 日 期：邕|；∥t 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：j啦导师签名： 玩日期：兰兰丝：￡!兰! 万方数据 山-亏．太雩傍t掌传话主目录 山-亏．太雩傍t掌传话主 目录 目录 ． ．。 。．．I CATALOGUE ．． ． ． Ⅺ 符号说明 。XX 中文摘要 ．1 AIlSTRACT ．。 。 。 。。 。 ．． ．． 5 前言 ．9 1．大蒜类有机硫化物的研究概述 ．．9 2．OSCS在肺损伤治疗和预防方面的文献综述 ．．11 3．液体药物固化的研究概述 ．12 3。1．Liquid．solid系统应用于挥发油类药物的研究 ．．12 3．2．包合物应用于挥发油类药物的研究 ．12 3．3．药物制剂新剂型用于挥发油类药物的研究 12 3．4．微囊制剂应用于挥发油类药物的研究 ．13 3．5．DATs的制剂研究进展 ．14 第一章体外评价二烯丙基三硫化合物对萘诱导肺损伤的保护作用 16 1．前言 16 2．实验方法 ．．16 2．1．材料和仪器 ．16 2．2．试剂配制 ．．17 2。3．DATS体外抗氧化能力评价 17 2．3．1-DPPH自由基清除能力测定 17 2．3．2．DATS还原能力测定 ．18 2．4．细胞培养 ．18 2．5．细胞毒性 ．18 2．6．IL-6，IL一8，TNF-Q和LDH澳0定 18 2．7．SOD和GSH—Px测定 19 2．8．ROS测定 ．19 2．9．western blot分析 ．19 2．10．免疫荧光 ．．20 万方数据 山．亏．大学傍士亏幢论主2．11．R■PCR检测 山．亏．大学傍士亏幢论主 2．11．R■PCR检测 20 2．12。数据统计 ．。2l 3．结果 ．．22 3．1．DATS体外抗氧化能力测定 ．22 3．1．1．DPPH自由基清除能力 ．22 3．1-2．还原能力测定 。23 312。细胞毒性 。 24 3．3．细胞内ROS的产生 ． ．25 3．4．IL-6，TNF-a，IL-8和LDH测定 ．26 3．5．SOD活性测定 ．．27 3．6．GSH—Px活性测定 ．．27 3．7。NF-KB活化检测 ．27 3．8．DATS下调IL-8 mRNA ．．29 4．讨论及结论 。30 5．本章小结 ．．32 第二章体内评价二烯丙基三硫化合物对萘诱导肺损伤的保护作用 33 1．前言 33 2．实验方法 ．．33 2．1．材料和仪器 ．33 2．2．动物及分组 ．34 2．3．样品制各及组织处理 ．34 2．4．血清样品生化检测 34 2．5．超氧化物歧化酶(SOD酶)活性检测 34 2．6．MDA含量检测 ．．35 2．7．TNF-a和IL_8含量检测 ．35 2．8．一氧化氮(N0)含量检测 ．35 2．9．MPO活性检测 35 2．10．GSH含量测定 ．35 2．11．组织切片分析 。35 2．12．免疫组化实验 ．．36 万方数据 山-亏．太学博士学位论盘2．13．数据处理 山-亏．太学博士学位论盘 2．13．数据处理 ．．36 3．结果 ．．36 3．1．血清样品分析 ．36 3．2．肝SOD，MDA，MPO和GSH测定 ．37 3．3．TNF-a，IL-8和N0含量测定 ．38 3．4．肺MPO，N0和GSH含量测定 ．39 3．5．肺组织切片 ．40 3．6．肝组织切片 ．42 3．7．免疫组化 ．43 4．讨论 ．．45 5．本章小结 ．46 第三章DATS体外方法学建立及理化性质研究 ．48 i．实验材料 ．48 1．1药品与试剂 ．．48 1．2仪器 48 2．分析方法学 ．48 2．1．色谱条件 ．48 2．2．溶液配制 ．4．9 2．3．专属性考察 ．49 2．4．线性范围 50 2．5．精密度和回收率 51 2．6．检测限和定量限 ．53 3．DATS制剂方法学建立 ．53 3．1．检测波长的选择 53 3．2．色谱条件 54 3．3．操作方法 ．54 3．4．系统适用性试验 。54 3．5