低氧训练对大鼠肾组织细胞凋亡相关因子的影响运动人体科学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 目的：通过采用不同持续时间低氧后训练的大鼠低氧训练模型， 研究低氧、训练以及低氧训练对大鼠肾组织细胞凋亡相关因子的影响。 方法：60只SD大鼠按体重随机分为6组，每组10只，即：对照 组(A)、低氧8h组(B)、低氧12h组(C)、常氧训练组(D)、低氧 8h训练组(E)和低氧12h训练组(F)。D、E、F组大鼠每天在坡度 为O的动物跑台上以25m／min的速度训练1h。训练完后，将B、E组 和C、F组依次放入氧浓度为12．5％(相当于海拔4000m)的低氧舱内8h 和12h。实验期为4wk，5d／wk。最后一次实验结束后24小时，大鼠均 实施速眠新II腹腔麻醉，其理想后断尾取全血(检测RBC、HB、HCT 值)后断头处死，取肾髓质外皮质部组织制备肾组织石蜡切片，HE染 色检测肾组织细胞的形态学变化；免疫组化法检测大鼠肾组织细胞 HIF．1a、B细胞淋巴瘤／白血病癌基因．2(B cell lymphoma／leukemia 2， Bcl．2)、Bax(Bcl—2 associated X，Bax)因子、EPO的蛋白表达以及 TUNEL标记法在光镜下观察肾组织凋亡细胞核数目。 结果： 1．RBC、HB、HCT三个指标的结果显示：B组与E组比较均具有 显著性差异(PD．05)；A组和D组比较亦均具有显著性差异(P O．05)。 2．肾组织切片进行HE染色显示：A组和B组大鼠肾组织细胞结 构完整，肾小管上皮细胞未见特殊改变；C组肾小管轻度肿胀，部分 刷状缘脱落，管腔内偶可见脱落的细胞；D肾小管扩张，细胞扁平， 轻度浊肿，刷状缘脱落，肾小球轻度淤血；E组较D组病变明显减轻， 肾小管变性范围和程度均明显小于和轻于D组，胞核基本正常，肾小 管轻度肿胀；F组肾小管上皮细胞水肿样变性，以近曲小管为重，表现 为肾小管管腔扩张，管内可见管形和脱落细胞；上皮细胞核染色质边 集，胞浆空泡样变性。 3．TUNEL染色切片统计学分析结果显示：E组和F组、C组与F 组比较，具有显著性差异(P0．05)；A组与D组比较，具有显著性 差异(P奶．05)。 4．免疫组化染色切片观察大鼠肾组织HIF．1a的蛋白表达显示：将 4．免疫组化染色切片观察大鼠肾组织HIF．1a的蛋白表达显示：将 实验各组肾组织样本的石蜡切片进行免疫组化染色，在显微镜下观察 发现：HIF．1a免疫组织化学阳性物质定位于细胞核内，呈弥散或颗粒 状或二者混合。呈强染性的肾组织细胞核中可见丰富阳性反应颗粒， 细胞核周围的胞浆内亦有阳性表达。统计学分析结果显示： B组、C 组分别与A组比较，均具有显著性差异(P郊．05)；E组和F组比较 具有显著性差异(P郊．05)；A组和D组比较，具有显著性差异(P O．05)。 5．免疫组化染色切片观察大鼠肾组织Bcl．2、Bax和EPO的表达 显示，Bcl．2、Bax和EPO免疫组织化学阳性物质定位于胞浆内，偶见 胞膜(或)核膜，细胞核被苏木素复染成蓝色。统计结果显示：A组、 B组、C组之间Bcl．2、Bax的表达均具有显著性差异(P如．05)：E 组与F组、C组与F组比较之间比较，具有显著性差异(PD．05)；A 组和D组比较具有显著性差异(Po．05)。EPO的表达结果显示：EPO 结果显示：B组和C组分别与A组比较，B组与A组有显著性差异(P 0．05)。 6．大鼠肾组织细胞凋亡与Bax、Bax／Bcl．2比值的相关性以及 HIF．1a与Bax表达的相关性显示：大鼠肾组织细胞凋亡与Bax、Bax／ Bcl一2比值之间存在正相关(P13．05)；肾组织细胞HIF．1a的蛋白表达 与Bax之间存在正相关(Po．05)。 结论： 1．合适的低氧刺激使SD大鼠有氧代谢能力提高。 2．低氧训练可诱导大鼠肾组织HIF—la、EPO、Bcl一2以及Bax蛋 白表达；细胞凋亡率与凋亡指数及病理损伤与运动时低氧刺激有关， 以低氧12小时训练组最明显。 3．Bcl．2与Bax参与调控肾组织细胞的凋亡；HIF—la的表达可能协 同Bcl．2家族凋亡相关因子的表达，在低氧训练导致的肾组织细胞凋亡 中发挥双重效应。 关键词：低氧，训练，低氧训练，肾组织细胞凋亡，Bcl．2，Bax， HIF一】a，EPO Ⅱ ABSTR ABSTR ACT Objects：This research aimed at discussing the effects of Hypoxia of different time and training apoptosis of the Renal of Rats，in order to find expression of HIF—la、EPO、Bcl一2 and Bax of the Renal of rats an