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3.自身抗体 实验结果:抗-A +,抗-B +,AC +,BC +,OC +,直抗 +。 临床提示:AIHA,自身红细胞被自身抗体致敏后在含蛋白的ABO定型血清中可能发生非特异性凝集 解决办法: ----37℃盐水洗涤红细胞至直抗阴性后检定血型。 ----红细胞经甘氨酸/HCl或二磷酸氯喹放散至直抗阴性后检定血型。 2.红细胞额外反应----获得性B抗原(类B) 临床提示:细菌感染(尤其是肠道细菌感染),以前为O型或A型。 实验结果: 解决方法 ----用酸化(pH 6.0)抗-B检测(无凝集) ----吸收放散实验,吸收抗-B的能力弱,区别于亚型 *临床追踪,感染控制后“类B”现象消失 混合凝集(mf) 混合凝集(mf): 部分红细胞凝集(大凝集块) 部分红细胞均匀分布(背景浑浊) ----近期输异型血 ----造血干细胞移植 ABO血型不同的造血干细胞移植后,如果植入存活,受者逐渐转变为供者血型的过程中,可能呈嵌合体状态。 如果供者O型,受者非O型,受者的A或B抗原逐渐减弱,抗体逐渐被检出。 是移植物存活的指标之一。 三个月内输异型血,一般直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性 血型鉴定:毛细管离心法(分离年轻和衰老红细胞) DNA鉴定(供者白细胞在受者外周血中存活期短,一般不干扰受者DNA鉴定) RhD误定 ----D抗原阳性误定阴性,D抗原阴性误定阳性 ----特例弱D ----D抗原遮断 解决疑难血型攻略 采用最经典的试管方法 用洗涤充分的红细胞制备悬液 增加高效价人源抗血清检测 增加抗-AB、抗-H和抗A1检测 吸收放散实验 DNA检测 直抗试验 *。 血型检定,抗体筛查和交叉配血三步也是确保安全有效输血的三关,交叉配血是最后一关,也是“三关”中最重要的一关。只要交叉配血真正相合(相容),将血液输给患者才是安全的。 主侧配血----患者血清与供者红细胞配血 次侧配血----供者血清与患者红细胞配血 ----全血要求交叉配血 ----血浆则只要求ABO同型输注。 ----不含血浆的红细胞只要求主侧配血 一般情况下,只要ABO、RhD血型检定正确 供/受者ABO、RhD同型配血,多数情况是相合的 如果不相合,则视为“疑难配血” 一般只有配血相合,才能输血 配血不相合,不能输血 特殊情况例外 交叉配血的方法 聚凝胺配血? 抗球蛋白试剂配血? 卡式配血? AABB推荐方法 The Antiglobulin Test Other Methods to Detect Antigen-Antibody Reactions Solid-Phase Red Cell Adherence Tests Column Agglutination Technology Enzyme-Linked Immunosorbent Assay 《全国临床检验操作规程》 第二篇临床血液学检验第六章血型血清学检查p246-271 第七节交叉配血试验p262 一、 交叉配血方法p262-264 (一)盐水介质配血法 (二)酶技术配血法 (三)抗人球蛋白配血法 (四) LISS 配血法 (五)微柱凝胶卡配血法 详见本章第四节第六部分。 第四节血清学常用检查 六、凝聚胶试验P258 第八节 微柱凝胶试验 可用于交叉配血p265 抗球蛋白试验(也成Coombs试验),它是以抗人球蛋白试剂作为连接桥,使不完全抗体致敏的红细胞连接并发生凝集。 微柱凝胶实验(简称 MCGT) 1986 年法国的Yves Lapierre 首先发明此方法, 1994年获美国FDA批准使用 ----凝胶过滤技术和免疫学的产物 ----是抗人球蛋白试验的技术延伸 原理:一定浓度的凝胶如筛子,把产生凝集的细胞团块阻挡于凝胶顶部,没有产生凝集的单个细胞则能够通过离心沉降于微管底部。 1.酶(除唾液酸分子,降低红细胞表面电荷) 2.聚凝胺试剂 3.聚乙二醇(浓缩抗体) 4.白蛋白添加剂(牛血清:在低离子浓度下可提高抗体浓度) 5.低离子液(大部分LISS含盐离子和大分子化合物) * 2014-10 疑难血型鉴定与疑难配血 疑难血型 疑难配血 主要内容 血型 ----血液中各种成分的遗传多态性标志 ----血型包括红细胞血型、白细胞血型、血小板血型、血清蛋白型……等 ----稀有血型 -----按美国稀有血型供者库规定,在人群中的频率1‰者,称稀有血型;在人群中的频率1/万者,称极稀有血型 -----我国对稀有血型尚无明确标准,一般认为Rh阴性就属稀有血型。 疑难血型 ----疑难血型是一种血型难以检定或判定的现象 ----在血型分类中没有疑难血型,文献中也查不到疑难血型的定义。 ----一份样本的血型检定是否疑
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