sunitinib对imatinib耐药k562细胞抗肿瘤作用及其机制分析临床医学专业论文.docxVIP

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 目的：通过研究多靶点酪氨酸激酶抑制剂Sunitinib对体外培养I(562细胞， Imatinib耐药细胞株K562G和多药耐药细胞株K562A的抑制作用，以寻找克服 Imatinib耐药的慢性粒细胞性白血病的新的靶向药物，并探讨其可能存在的分子 机制： 材料与方法：1．回顾性分析我科近5年收治的84例慢性粒细胞性白血病住 院病人的基本情况。2．wST方法验证Imatinib耐药细胞株K562G及阿霉素诱导 多药耐药细胞株K562A耐药诱导是否成功，计算耐药倍数，流式细胞仪检测 Imatinib对细胞周期的影响。3．WST法检测Sunitinib对K562、K562G和K562A 细胞活力的影响，流式细胞仪检测Sunitinib对细胞周期的影响。4．采用RT-PCR 方法分析Sunitinib抗耐药CML细胞增殖可能存在的分子机制。 结果：1．我科自2006年1月至2010年12月共收治84例确诊为慢性粒细 胞性白血病的住院病人，处于慢性期59例(70．24％)、加速期14例(16．67％) 及急变期11例(13．10％)，中位年龄为35岁，男／女为3．42／1；伴有肝脾肿大的 患者约占86．90％，接受异基因造血干细胞移植的26例，其中亲缘供者20例， 无关供者移植6例；其余患者接受药物治疗。2．Imatinib和阿霉素诱导的K562 耐药细胞株，经验证Imatinib 15pmol／L不能抑制K562G细胞增殖，显示了大于 30倍的耐药，K562A细胞显示了大于3倍的耐药。3．细胞增殖实验：不同稀释 浓度药物与细胞共培养48h后，K562细胞组Sunitinib和Imatinib抑制细胞生长 增殖的IC50分别为1．622+0．55421maol／L和0．5236+0．22661maol／L，两者相比具有 显著性差异(P0．05)；K562A细胞组Sunitinib和Imatinib抑制细胞生长增殖的 IC50分别为1．208：￡-0．2687pmol／L和4．634+1．850p．mol／L，两者相比具有显著性差 异(PO．05)；K562G细胞组Sunitinib和Imatinib抑制细胞生长增殖的IC50分 别为13．33+1．11pmol／L和113．363+4．8351xmoFL，两者相比具有显著性差异 (P0．05)。4．流式细胞仪检测结果：Sunitinib和Imatinib 15I-tmol／L与细胞共培 养12h，K562细胞组S期细胞比例与对照组相比均无统计学差异，G2／M期细胞 比例分别为31．76-a：3．78％和7．6-士0．29％，具有显著性差异(P0．05)；K562A细胞 组S期细胞比例分别为43．78+11．88％和62．01+3．204％，G2／M期细胞比例分别为 32．71+7．25％和1．05士1．74％，均具有显著性差异(P0．05)；K562G细胞组S期、 中文摘要G2／M期细胞比例与对照组相比均无统计学差异。Sunitinib和Imatinib 中文摘要 G2／M期细胞比例与对照组相比均无统计学差异。Sunitinib和Imatinib 15 I．tmol／L 与细胞共培养24h，K562细胞组S期细胞比例分别为23．63-4-7．83％和 35．35+8．11 1％，G2／M期细胞比例分别为42．624-1．91％和1．74+2．89％，均具有显 著性差异(P0．05)；K562A细胞组S期细胞比例分别为23．3+3．16％和 54．57+0．752％，G2／M期细胞比例分别为37．23士3．73％和0．20+0．01％，均具有显 著性差异(P0．05)；K562G细胞组S期细胞比例分别为39．97+8．21％和 72．294-1．104％，G2／M期细胞比例分别为46．56+3．40％和0．994-0．78％，均具有显 著性差异(P0．05)。Sunitinib可诱导细胞S期比例下调、G2／M期阻滞并具有一 定的时间依赖性。5．RT-PCR结果：Sunitinib和Imatinib 151maol／L与细胞共培养 12h，K562细胞组Caspase 3相对表达量为0．6267-4-0．004和1．9234-0．0645，Mcl．1 相对表达量为0．1424+0．1056和0．4574+0．0573，均具有显著性差异(P0．05)； K562A细胞组Caspase 3相对表达量为1．246+0．0871和1．1233+0．0977，Mcl．1相 对表达量为1．216-a：0．08992和0．8831+0．0728，均具有显著性差异(PO．05)：K562G 细胞组Caspase 3相对表达量为1．2160+0．0