单击此处添加主题.pptVIP

食品中的菌落总数的测定;Contents;一、实验目的与原理;二、实验材料;三、实验方法与步骤;2、检样稀释及培养 （1）以无菌操作，将检样包装打开，用吸管取25ml鲜牛奶，放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。 （2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。;（4）根据食品卫生检验标准要求和检样的菌落数量，选择3个连续适宜稀释度即10、10-1、10－2，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 （5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使与稀释检样混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 （6）等琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。 ;四、检样中细菌菌落总数的计算;公式计算：　　;实验结果与记录;五、室内空气中细菌总数检测实施细则;四、仪器和设备 1．高压蒸汽灭菌器。2．干热灭菌器。3．恒温培养箱。4．冰箱。5．平皿。（直径9㎝）6．制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。7．撞击式空气微生物采样器（FSC-IV便携式浮游生物采样器）。 五、培养基 1．营养琼脂培养基 1．成分：蛋白胨 20g ，牛肉浸膏 3g ，氯化钠 5g 琼脂 15g～20g ，蒸馏水 1000ml。 2．制法：将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。营养琼脂平板的制备参照采样器使用说明。;六、选点要求 1．采样点的数量根据监测室内面积大小和现场情况而确定，以期能正确反映室内空气污染物的水平。原则上小于50㎡的房间应设（1～3）个点；50㎡～100㎡设（3～5）个点；100???以上至少设5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。2．采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5m。3．采样点的高度：原则上与人的呼吸带高度相一致。相对高度0.5m～1.5m之间。;七、采样 将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。一般情况下采样量为30L～150L，应根据所使用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。 八、样品培养 样品采完后，将带菌营养琼脂平板置36℃±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数。以每立方米菌落数（cfu/m3）报告结果;Thank You !