第五章药物代谢.ppt

本章要求： 掌握药物代谢的主要途径、部位，酶； 熟悉运用药物代谢酶性质进行制剂设计的方法； 了解药物代谢研究方法。 §1 概述 １、定义 Drug metabolism/biotransformation:药物被机体吸收后，在体内各种酶以及体液环境作用下，可发生一系列化学反应，导致药物在体内化学结构上的改变 §1 概述 ２、代谢反应 　　第一相反应：氧化、还原、水解，通常是脂溶性药物通过反应生成极性基团； 氧化：侧链烷基→醇或酸 羟化反应 脱氨和脱硫作用 醇和醛→酸 还原：羧基、羟基、硝基和偶氮基等 水解：酯、酰胺和酰肼→羧酸，或杂环化合物水解开环 §1 概述 ２、代谢反应 　第二相反应：即结合反应，通常是药物或第一相反应生成的代谢产物结构中的极性基团与机体内源性物质反应生成络合物 葡萄糖醛酸结合 硫酸结合 甘氨酸结合 乙酰化 甲基结合 3、代谢结果 　　１）活性改变： 　　　　失活：多数药物 　　　　活性降低：氯丙嗪---去甲氯丙嗪　　　　 　　　　活性增强：非那西丁---对乙酰氨基酚 活性激活：左旋多巴---多巴胺 　　　　毒性增加：异烟肼---乙酰肼 　　2）极性改变： 　　　　增加---易于排泄 　　　　减小---排泄时间延长 一、药物代谢酶系统 （一）微粒体酶系： 　　 性质：1、酶的活性成分：细胞色素P450（CYP450） 2、重要物质：辅酶Ⅱ，分子氧、 Mg2+ 、黄素蛋白、非血红素铁蛋白等 3、特异性低：可氧化代谢多种类型药物 　　 　　 4、可受多种药物的诱导和抑制。 5、主要存在肝内质网 人类细胞色素P450家族 §4 影响药物代谢的因素 P144 一、给药途径：首过效应 二、剂量与剂型：代谢饱和现象 三、酶的抑制和诱导作用 保泰松对地高辛等的化谢起诱导作用 对苯妥英钠起抑制作用 四、生理因素 §5 药物代谢和制剂设计 P151 多巴胺 治疗帕金森病的首选药物 进一步研究发现：肠壁内脱羧酶的活性在小肠回肠末部最高，而左旋多巴的主要吸收部位十二指肠吸收，此处酶活性较低易饱和 2、制成十二指肠速释制剂：肠溶性泡腾片 3、制成复方制剂：左旋多巴+卡比多巴或苄丝肼 原因：多巴脱羧酶代谢药物 效果：疗效增加，不良反应减少 §5 药物代谢研究方法 一、体外法 （一）肝灌流法 离体肝脏，门静脉插管流入，肝静脉插管流出，一定时间取灌流液，测药物及代谢物浓度； （二）肝切片法 一、体外法 （三）肝微粒体法 肝微粒体的制备（差速离心法） 1、实验用具、溶液、环境控制不超过4 ℃。 2、动物于最后一次给药后禁食24 h； 3、脱臼处死，剖开腹腔，用生理盐水（0-4 ℃），冲洗肝脏，滤纸吸干，组织剪剪碎，约2 mm3大小，用PBS液反复冲洗，称重，按1: 4比例加入pH 7.4的0.1M Trsi-HCl缓冲液，制成匀浆。 §5 药物代谢研究方法 4、4 ℃下以9 000 ╳ g离心30 min，上清液在4℃下以l00 000╳g离心60 min，用Tris-HCl缓冲液洗涤沉淀3次，弃去上清液，粉红色沉淀即为肝微粒体； 5、将沉淀物悬浮于Trsi-HCl缓冲液（20%的甘油PBS）中，置-80 ℃冰箱内保存，根据需要于实验前取出所需的量使用。 例：汉黄芩素对大鼠肝P450酶含量的影响 双光束分光光度法测定肝微粒体P450酶含量 取各肝微粒体匀浆样品0.3mg·mL-1的肝微粒体悬液蛋白； 分别置于对照池及样品池，静置2 min，调零； 向样品池缓慢通入CO大约1min (约为2秒一个气泡)； 分别往对照池及样品池加入连二亚硫酸钠数毫克，立即颠倒混匀，稳定2 min； 紫外分光光度计从400 nm向500 nm扫描，读取450nm及490nm的吸光度，计算差值，依下式求算P450酶含量。 双光束分光光度法测定肝微粒体P450酶含量 P450含量(nmol·mgPro-1)=△OD(吸光度差值)×103/91×蛋白终浓度(mg·mL-1) 含量可依据450~490nm间的克分子消光系数91 mmol·ml-1计算。 例：汉黄芩素对大鼠肝P450酶含量的影响 一、体外法 （四）肝细胞培养法 不足之处：培养过程中，部分CYP450难以表达；其活性可能因此丢失。 §5 药物代谢研究方法 二、在体法 （一）药物探针法 如某些药物选择性地经某一同工酶代谢