茉莉花遗传多样性及亲缘关系的issr分析作物遗传育种专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 茉莉花遗传多样性及亲缘关系的ISSR 茉莉花遗传多样性及亲缘关系的ISSR分析 摘要 茉莉花(Jasminum sambac(L．)Atiton)木樨科素馨属多年生灌木，起 源于波斯湾一带，种质资源十分丰富。但长期以来，对茉莉花资源的分 类和利用，都是采用林奈和恩格勒的形态特征分类法，往往有些种、品 种和品系在外貌和形态特征上十分相似，但亲缘关系和遗传特性却相差 巨大，使得茉莉花的分类地位及亲缘关系一直存在着较多的争议，并给 茉莉花的新品种培育和资源利用带来困难。本试验以广西区域内广泛收 集的茉莉花品种为试材，应用ISSR分子标记技术，探讨茉莉花的分类和 品种之间亲缘关系的研究。试验结果表明： 1、通过对SDS、CTAB和改良CTAB法三种基因组DNA提取方法的 比较，从纯度、产率等方面考虑，认为改良CTAB法较为适合茉莉花基 因组DNA的提取。采用该方法提取的茉莉花基因组DNA，经电泳检测， 主带清晰，无降解，分光光度计检测，A260／A280的值在1．81一1．84之间， 符合PCR反应的要求。 2、通过对Taq DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Primer不同浓度 的优化试验及对PCR反应程序的筛选，确定了合适的反应体系和反应程 序，从而建立了茉莉花的ISSR分析技术体系。在20}tl反应体系中，模 板DNA 75ng，Primer 5 jxrnol，rTaq polymerase 1 U，dNTP 4 mmol，buffer (含M92+)2ul。反应程序为：预变性，94。C 5min；变性，94。C lmim退火， X℃lmin；延伸， X℃lmin；延伸，72℃2min；40个循环，72C延伸lOmin，4℃保存。 3、利用筛选得到的lO条ISSR引物对全部茉莉花材料进行PCR扩 增，30份扦插苗得到70个位点，其中多态性位点数为34个，多态位点 百分率为48．57％；扩增135份实生苗得到70个位点，其中多态性位点数 为42个，多态位点百分率为60％；扩增24份实生苗得到66个位点，其 中多态性位点数为44个，多态位点百分率为65．7％。扩增片段长度分布 在100bp-2000bp之间，平均每个引物能扩出7条带。 4、运用NTSYS软件，采用Dice相似系数分析ISSR反应结果，得 到了24个品种间的亲缘关系树状图。以O．77作为相似系数的分界点， 24个实生苗样品通过基因组ISSR分成2大类：花蕾较多的为一类，另一 类在相似系数O．84的水平将其余的23个茉莉花材料分为4个品种群：群 I：叶型基本相同的；群II：分枝少，花期晚；群IⅡ：无分枝，花期晚；群IV：无 分枝，花蕾少。该结果与传统的分类结论基本一致。 5、利用ISSR技术可以对基因组的所有序列直接分析，不受环境的 影响，在分子水平上利用ISSR技术对供试茉莉花品种(系)进行遗传多 样性和亲缘关系鉴定，结果非常可靠，是种质资源研究中快速、可靠、 有效的新技术，能为杂交育种亲本组配提供有价值的分子水平上的信息。 关键词：茉莉花(Jasminum sambac(L．)Atiton) 遗传多样性ISSR PCR II Studies Studies on The Genetic Diversity and Relationship of Jasminum Sambac(1．)Aiton Cultivars by ISSR Analysis Qiu Changyu (College ofAgriculture，Guangxi University,Nanning 530004，China) Abstract dasminum sambac(L．Ⅵtiton iS sweetclover Branch Jasminum，which originated in Persian Gulf．and its variety resource is very abundant．The utilization and classification of Jasmine germplasm resources were adopted by me botany classification system of linnaean、or Engler for a long time． There are arguements on the genetic relationship and classification among the native varieties of Jasmine for many years，which had made grate trouble in breeding new variety and util