泛耐药鲍曼不动杆菌与其主动外排泵蛋白的相关性研究病原生物学专业论文.docxVIP

目 目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 英文摘要 5 研究论文 泛耐药鲍曼不动杆菌与其主动外排泵蛋白的相关性研究 前言日U舌 ‘77 材料与方法 ．8 结果 ．．13 附图 ．．16 附表 ．．22 讨论 ．．27 结论 ．．31 参考文献 ．．32 综述 ．36 致谢 _ ．52 个人简历 53 中文摘要泛耐药鲍曼不动杆菌与其主动外排泵蛋白的相关性研究 中文摘要 泛耐药鲍曼不动杆菌与其主动外排泵蛋白的相关性研究 摘 要 目的：了解临床出现的鲍曼不动杆菌对19种常用抗菌药物的耐药情 况；探讨鲍曼不动杆菌主动外排泵在耐药方面的作用、基因表达；观察外 排泵抑制剂改变鲍曼不动杆菌耐药的情况，指导临床合理使用抗生素，提 高泛耐药鲍曼不动杆菌治疗效果，改善患者预后有重要意义，同时为研制 开发新的抗菌药物提供理论依据。 方法： 1随机收集非重复鲍曼不动杆菌共142株，并测定19种抗菌药物的最 低抑菌浓度(MIC)：阿米卡星、庆大霉素、氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦、 哌拉西林、头孢他啶、 亚胺培南、环丙沙星、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西 林／他唑巴坦、美罗培南等药物。 2羰基氰氯苯腙(CCCP)泵抑制剂对菌株MIC的影响：抗生素二倍稀 释系列培养基中联用泵抑制剂，同时制备仅含泵抑制剂的培养基作为生长 对照。比较应用CCCP泵抑制剂前后MIC值的变化，以加入泵抑制剂后MIC 值比不加泵抑制剂降低4倍或以上作为外排泵表型阳性的判定标准。 3对外排泵阳性株进行外排泵蛋白基因的检测和分析：提取外排泵表 型阳性株DNA，用PCR扩增主动外排系统调控基因并测序，扩增产物以 1．5％的琼脂糖凝胶进行电泳，凝胶成像分析系统对电泳带进行照相和灰度 扫描。 4用WHONET统计软件矛D SPSS 13．0进行数据处理 结果 l 142株临床鲍曼不动杆菌分离菌株的主要来源分别是是痰液 (72．6％)、分泌物(11．3)，而鲍曼不动杆菌菌株高发于ICU(40．8％)、呼吸内 科(14．8％)。 2 142株临床鲍曼不动杆菌分离菌株对19药物敏感测定结果显示，对 多粘菌素B的敏感率100％，四环素的耐药率最高94．5％，对诺氟沙星、庆 大霉素、头孢噻肟、氨苄西林耐药率达90％以上，亚胺培南和美罗培南耐 药率分别为34．5％、36．6％。共筛选出多重耐药及泛耐药菌96株。 中文摘要3筛选出的96株多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌在加入CCCP前后， 中文摘要 3筛选出的96株多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌在加入CCCP前后， 庆大霉素耐药率降低65．63％，耐药菌株数减少63株，四环素、诺氟沙星、 头孢噻肟MIC值降低4倍及以上分别有32株、41株、29株。对四种抗生素 MIC值均降低4倍及以上34株。 4从34株鲍曼不动杆菌检测到adeB、adeR、adeS、adeJ、adeE、abeM 基因分别有33株、32株、33株、33株、O株、33株，检出率分别为97．06％、 94．12％、97．06％、97．06％、O．OO％、97．06％。 5对adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM基因进行测序，结果显示与Genebank 中参考菌株序列同源性为100％，未发现基因变异现象。 结论： 1临床鲍曼不动杆菌分离菌株对临床多种常用的抗菌药物存在普遍 耐药。 2对筛选的96株多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌进行CCCP处理后， 34株(35．42％)对最耐药的四种抗生素的MIC值均降低4倍及以上。 3从34株可能由于外排泵的存在而产生耐药的鲍曼不动杆菌检出 adeB，adeR，adeS，adeJ、abeMo 4耐药基因adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM序列与Genebank参考 株序列核苷酸同源性均为100％，未发现基因变异现象。 关键词：鲍曼不动杆菌；多重耐药；主动外排系统；外排泵抑制剂； 基因检测；基因分析 英文缩写Study 英文缩写 Study on Drug—resistance and Drug—resistant Genes of Pan．resistant Acinetobacter baumaannii ABSTRACT Objective：To investigate drug resistance in Acinetobacter Baumannii to commonly used antimicrobial drugs．To detect the efflux pump systematic phenotype and genotype of the panresistant Acinetobacter baumannii．To investigate the function and gene expression of acineto