gpr124在糖尿病肾病足细胞损伤中的保护作用药理学专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文CONTENTS 山东大学硕士学位论文 CONTENTS ABSTRACT IN CHINESE 。1 ABSTRACT ．4 ABBREVIATIONS 。7 THE PROTECTIVE ROLE OF GPRl 24 IN DIABETIC—INDUCED PODOCYTES INJURY ．9 INTRODUCTION 9 MATERIALS 13 A．Experimental samples 1 3 B．Dmgs and regents ．1 3 C． Fonnula of dn】gs and reagents 1 5 D．Instruments 1 8 METHODS 20 A．Animal stlldies ．．20 B． Cell studies 22 C． Statistics ．23 D．Steps in detail．． ．．24 PART 1：THE EXPRES SION AND ROLE 0F GPR1 24 IN DIABETIC．INDUCED PODOCYTES INJURY 。30 A． Results ．30 B． Discussions ．．38 C． Conclusions ．．42 PAI之T2：GPRl24 EXPRESSl0N IN OTHER PODOCYTOPATHIES 。43 A． Results ．43 B． Discussions ．．47 C． Conclusions ．．48 REFERENCES 49 ACKNOWLEDGEMENT ．54 万方数据 山东大学硕士学位论文PUBLICATl0NS 山东大学硕士学位论文 PUBLICATl0NS 55 THESIS REVIEW AND DEFENCE 56 万方数据 山东大学硕士学位论文GPRl24在糖尿病肾病足细胞损伤中的保护作用 山东大学硕士学位论文 GPRl24在糖尿病肾病足细胞损伤中的保护作用 硕士研究生 段倚琦 指导老师 易凡教授 中文摘要 背景： 糖尿病肾病(DiabeticNephropathy，DN)是糖尿病患者最主要的微血管病变 之一，并且是导致终末期肾病的主要因素。肾小球足细胞是一种高度分化、具有 独特结构和功能的上皮细胞，是构成肾小球滤过屏障的关键组成部分。研究表明 足细胞损伤是糖尿病肾病重要的细胞事件，是导致肾脏损伤的起始因素。多种因 素参与了糖尿病肾病足细胞损伤，包括氧化应激、高血糖、脂质代谢紊乱及炎性 反应等，然而针对目前机制所采取的治疗措旋均未能阻滞糖尿病。肾病的发展进程， 因此进一步明确糖尿病’肾病足细胞损伤的的发病机制并寻找新的药物靶点是目 前亟待解决的问题。 G蛋白偶联受体(G．protein Coupled Receptor，GPCR)是目前发现最大的一 类受体超家族，其成员超过1000个。GPCR在多种重要的生理功能中扮演重要 角色，这包括视觉、味觉、嗅觉、情绪的调控、免疫系统的激活和肿瘤的生长等。 根据氨基酸序列的同源性和功能差异GPCR可分为以下五大亚家族：Glut锄ate GPCRs，Rhodopsin GPCRs，Adhesion GPCRs，Frizzled／1随ste2 GPCRs，Secretin GPCRs。GPCR是最重要的药物靶点，其功能研究一直是生物学与药物研发的研 究热点。近年来，越来越多的研究表明多种GPCR在糖尿病肾病发病过程中起到 关键作用， 如血管紧张素II受体(ATR)、前列腺素E2(PGE2)受体(EP)、 内皮素一l(ET-1)受体(ETAR)及腺苷受体(A2R)等，而相应的EP阻滞药、 血管紧张素转化酶抑制剂、ETAR拮抗剂等均能够延缓糖尿病肾病的进展，因此 作用于GPCR的药物已经成为糖尿病肾病的重要治疗策略。 GPRl24是一种孤儿受体，从属于Adhesion GPCRs亚家族。GPRl24包含 1331个氨基酸的开放阅读框，其中仅胞外N末端区域就占有760个氨基酸。主 要结构包含GPS，HormR，Ig，LRRCT， PDZ，RGD，7TM。目前关于GPRl24 的研究大多报道了其在大脑中枢神经系统的功能。文献报道唧rJ724的缺失扰乱 了TGF一6通路的激活过程，并且出现了血管内皮组织中大量VEGF指示基因表 万方数据 山东大学硕士学位论文达上调；内皮中GPRl24调节血管生成，迁移和血脑屏障标记蛋白Glutl的生成， 山东大学硕士学位论文 达上调；内皮中GPRl24调节血管生成，迁移和血脑屏障标记蛋白Glutl的生成， 并且推测Glutl可能为GPRl24下游位点；另外，GPRl24可作为Wnt7特异性 共激活子，在其诱导的经典B．catenin通路中起着关键的作用。以上的这些因