胆道肿瘤潜在标志物及其分子机制的研究外科学专业论文.docxVIP

复 旦 复 旦 大 学 硕 士 学 位 论 文 胆 道 肿瘤潜在 标志物及其 分子机制研 究 中文 摘 要 胆 道 肿 瘤 恶 性 程 度 高 、预 后 差 ，早 期 诊 断 、根 治 性 手 术 切 除是 获 得 长 期 生 存 的唯 一机 会 。寻 找 有 助 于胆 道 恶 性 肿 瘤 早 期 诊 断 、判 断 预后 的肿 瘤 标 志物 ，以及 与 肿 瘤 发 展 相 关 的 蛋 白作 为 药 物 作 用 的靶 分 子 是 目前 胆 道肿 瘤 研 究 的热 点 之 一 。 本 课 题 运 用 双 向 电泳 联 合 质 谱 技 术 筛 选 胆 道 肿 瘤 的潜 在 标 志 物 。在 胆 汁 、 组 织 、 细 胞 等 水 平 共 鉴 定 出 良 恶 性 组 间 差 异 表 达 的 蛋 白 5 1 个 。 其 中 S tathm in/oncopro te in 18 同时在 胆 道癌 、胆 囊癌 细 胞 系 中高表 达 ，Mrp l4 同 时 在 恶 性 胆 汁 及 组 织 中 高 表 达 。 应 用 RNA 干 扰 技 术 ， 将 con tro l- s iRNA 或 S ta thm in- s iRNA 转 染 胆 道 肿 瘤 细 胞 R B E 和 Q BC9 39 中 ，使 S ta thm in 在 m RN A 水 平 和 蛋 白水 平 表 达 均 下 调 ，发 现 RB E 与 Q BC 9 39 细 胞 的 迁 移 也 受 到 显 著 抑 制 ， 并 且 S ta thm in 的 表 达 水 平 与 FA K 磷 酸 化 的 水 平 iH 相 关 。 随 后 运 用 细 胞 免 疫 荧 光 的 方 法 结 合 激 光 共 聚 焦 显 微 镜 扫 描 ，证 明 了在 胆 道 肿 瘤 细 胞 中 ，S ta thm in 与 FA K 共 定 位 于 细 胞 质 和 细 胞 膜 上 ，共 定位 的 区域 在 细 胞 内不 是 均 匀 分 布 的 ，主 要 位 于 细 胞 伪 足 部 分 。 综 上 所 述 ， 我 们 发 现 S ta thm in 在 胆 道 肿 瘤 中于 m RN A 和 蛋 白水 平 表 达 上 调 ， 高表 达 的 Sta thm in 增 强 了其 与 FA K 间相 互 作 用 ，促 进 FAK 磷 酸 化 的作 用 ， 引起 FA K 的活 化 及 其 下游 通 路 促 进 的细 胞迁 移 。因 而 ，在 胆 道 肿 瘤 的 临床 治 疗 中可 以 将 S ta thm in 作 为标 志 物 和 治疗 祀 点之 一进 行 深 入 研 究 ，通 过 抑 制 其 表 达 或 者 下 调 活 性 而 达 到 治 疗 目的 。 关键词 ：胆道肿瘤 文Stathm in ；FAK ，肿瘤标志物 ，细胞迁移 ！蛋 白质 组学 中 图分类 号 :R6 1 复 旦 复 旦 大 学 硕 士 学 位 论 文 P o t en t ia l B iom ar k er s F or B i l iar y T r a c t N eop la sm A n d It s M o l e c u l a r M e c h a n i s m A b s t r a c t B il ia r y tr a c t n e op la sm s a r e h ig h ly fa ta l d is ea s e s w it h p o or pr o g n o s is . C u r a t iv e t r e a t m e n t c a n o n ly b e e x p e c t e d f r o m s u r g i ca l r e s e c t io n o f e a r ly s t a g e tu m o r s . H o w e v e r , t h e m a jo r it y o f p a t ie n t s i n it ia l l y p r e s e n t w ith a d va n ce d d isea s e . T o p r o v id e c l u e s to f in d b iom a r k er s f or ea r ly d ia g n o s is, p r o g n o s i s a nd t h er a p y , a s w e l l a s to u n d e r s ta n d th e m o le c u lar m e c h a n i sm s go v er n in g c an c er pro gr e s