丹参对人肾间质成纤维细胞体外增殖的影响病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

英汉缩略词对照 英汉缩略词对照 表 DS．201 sodium tanshinone II．A sulfonate 丹参酮II A磺酸钠 hIUFs human renalinterstitial fibroblasts 人肾间质成纤维细胞 RIF renalinterstitial fibrosis 小管一间质纤维化 GS glomerulosclerosis 肾小球硬化 UUO unilateral ureteral obstruction 单侧输尿管梗阻 ECM extracellular matrix 细胞外基质 ICC immunocytochemistery 免疫细胞化学 SABC Streptavadin-avidinebiotin-peroxidase过氧化物酶标链亲和素生 Complex technique 物素 SP streptavidin—perosidase 链霉菌抗生物素蛋白一过 氧化物酶连结法 DAB 3，3-diaminobenzidine 二氨基联苯胺 MTT methyl thiazolyl tetrazolium 甲基噻唑基四唑 CDKs cyclin dependent kinases 细胞周期素依赖激酶 CDKI cyclin-dependent kinase inhobitor 细胞周期素依赖激酶抑制 剂 NBS new beef serum 小牛血清 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 IR inhibition ratio 抑制率 HE hematoxyl in and eosin 苏木素／伊红 FCM Flow Cytometry 流式细胞术 PI PI propidine iodide 碘化丙啶 vimentin 波形蛋白 keratin 角蛋白 desmin 结蛋白多日虫口 4l 泸州医学院硕士研究生 泸州医学院硕士研究生 学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包 含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的 启发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者躲奄铣 签字日期．伽衫年彭月砂日 泸州医学院学位论文版权使用授权书 本人完全了解泸州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即： 泸州医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘， 允许论文被查阅和借阅。本人授权泸州医学院可以将学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布学位论文的全部或部分内 容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文，即：泸州医学院 具有学位论文的数字化制品复制权，信息网络传播权和汇编权。保密的学 位论文在解密后适用本授权书。 ，， 学位论文作者签名：砺圪裳 导师签名： 签字日期讯劳苫月 砂曰 签字日期： ／飞目 丹参对人肾间质成纤维细胞体外增殖的影响摘 丹参对人肾间质成纤维细胞体外增殖的影响 摘 要 目的：本研究采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction，UUO) 患者肾脏手术取材标本通过体外培养、鉴定人肾间质成纤维细胞(human renal interstitial fibroblasts，hRIFs)并观察中药丹参的主要成分一一丹参酮 II A磺酸钠(sodium tanshinone II．A sulfonate，DS．20 1)对人肾间质成纤维 细胞体外增殖周期的影响以及P16、P27表达的影响，从分子水平揭示丹 参酮II A磺酸钠影响hRIFs体外增殖的作用机制，阐明其在延缓肾间质纤 维化过程中作用的具体环节，为中药丹参治疗肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis，RIF)提供理论和实验依据。方法：1．单侧输尿管梗阻 (uuo)患者手术取材标本，采用组织块培养法体外培养人肾间质成纤维细 胞。用倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学(immunocytochemistery, ICC)技术和染色体核型分析对各代细胞进行鉴定。2．取第3．-一5代对数生 长期的hRIFs进行实验。①采用免疫细胞化学技术和图像分析技术检测 0mg／ml、0．5 mg／ml、1．0 mg／ml、2．0 mg／ml DS一201孵育hRIFs 72小时后 P16、P27的表达，并检测阳性率及阳性细胞平均光密度值；②流式细胞 技术检测0mg／ml、0．5 m#ml、1．0 mg／ml、2．0 mg／ml DS．201对hRIFs体 外增殖周期的影响。结果：1．原代培养5．-．7天后，组织块周围开始长出 细胞