x射线宫内照射诱导结节性硬化大白鼠模型特点神经病学专业论文.docxVIP

目 目 录 1 x射线宫内照射诱导模拟结节性硬化大白鼠模型特征 1 1．1 中文摘要 1 1．2 英文摘要 3 1．4 材料与方法 10 1．6 讨{仑 27 1．7 结论 32 1．8 参考文献 33 1．9 英汉缩略词对照表 41 2 致谢 42 3 附图 43 4 局灶性皮质发育畸形的分类进展(综述) 51 万方数据 四川医科大学硕士学位论文X射线宫内照射诱导模拟结节性硬化大白鼠模型特征 四川医科大学硕士学位论文 X射线宫内照射诱导模拟结节性硬化大白鼠模型特征 捅 要 目的：探讨X射线宫内照射诱导模拟的结节性硬化大白鼠动物模型的脑、 心脏、肾脏、皮肤、眼睛、肺、牙齿等主要病理特征，为进一步研究结节 性硬化的发病机制及致痫机制打下基础。方法：①将8只健康妊娠17天的 SD大鼠随机平均分为4组，即正常对照孕鼠组(2只)、接受剂量为175c6y 的X射线照射组(175cGy孕鼠组，2只)、195cOy孕鼠组(2只)、215coy 孕鼠组(2只)。各孕鼠组所产仔鼠一代(Fl代)饲养成年后作为实验对象； ②行为学观察法：成年当日(年龄=2月)即开始用视频监控在自然光线下 进行24小时动态录像，持续时间为30天，观察活动、摄食、饮水、昼夜 节律等情况，着重了解有无自发性癫痫发作；③水迷宫实验法：分别利用 定位航行、空间探索及可视平台的实验方法检测大鼠的空间学习记忆能力； ④脑电图检测：利用电极针行脑双侧额、顶叶皮质，海马区脑电图监测， 均在大鼠麻醉状况下进行；⑤所有实验动物实验终止后均进行心脏灌流固 定，观察大白鼠皮肤、口腔、牙齿及甲周有无异常，获取大白鼠脑、心、 肾、肺、眼睛的大体标本，进行数码相机采图，对脑组织进行体积测定、 称重，脑前后径、左右径及上下径测量，测量结束后对脑分别进行冰冻及 石蜡切片，行Nissl染色和HE染色，除脑外的其他脏器均行石蜡切片、HE 染色。结果：①行为学观察：正常对照组无自发性癫痫发作，模型组夜间 活动均较正常对照组增多，表现为洗脸样动作、舔毛、搔痒、打架、追逐 活动频繁，观察时间内模型组大鼠共发现3只达Racine分级3级以上的自 发性癫痫发作，发生率为16．7％。②水迷宫实验：模型组大鼠逃避潜伏期 均明显长于正常对照组，有统计学意义(PO．05)；随着训练次数的增多， 各实验组逃避潜伏期均逐渐缩短，但模型组仍长于正常对照组；模型组目标 象限时间百分比及穿越平台次数明显差于正常对照组，有统计学意义 (尺0．05)，模型组组间比较无差异。③脑电图：3．5％水合氯醛麻醉状态下， 万方数据 四川医科大学硕士学位论文模型组额叶、顶叶皮质及海马处均可发现频发的痫样放电，且双侧均出现。 四川医科大学硕士学位论文 模型组额叶、顶叶皮质及海马处均可发现频发的痫样放电，且双侧均出现。 正常组可见极少量的痫样放电，总痫样放电发生率中位数为0．9次／min， 175cGy组总痫样放电发生率中位数为8．3次／min，195cGy组为15．5次 ／min，215cGy组为12．1次／min。各模型组与正常对照组总痫样放电发生 率比较Y0．01，差异有统计学意义，模型组组间比较差异亦存在统计学意 义。④大体标本及多系统病理学观察：各实验组未见皮肤、甲周、牙齿异 常，215cGy组中有1例发现一侧肾脏体积明显增大，免疫组织化学证实为 肾母细胞瘤，余实验组未见结节性硬化的多系统肿瘤表现。模型组大鼠脑 体积变小(主要表现为前后径缩短明显)，重量变轻，四叠体暴露；冠状面 可见胼胝体部分或者完全缺失，脑皮质变薄，各脑室系统扩大，侧脑室扩 大明显。脑Nissl染色示模型组脑皮层异常，皮层变薄、各层次分界模糊、 皮质内及皮质下异位结节；海马结构异常，表现为CAl、CA2、CA3区神 经元排列分散，CAl区常出现结节；室管膜下结节、胼胝体缺失，脑室扩 大。脑HE染色示模型组大鼠脑皮质结构异常，分子层及II～III层内均可见 多发的结节；皮层下结节；海马区结节，多发生于CAl区，结节内细胞排 列紊乱，树突、轴突极性紊乱，可见部分神经元固缩、巨大神经元、不成 熟神经元。结论：(1)X射线宫内照射孕17d大鼠能较好的模拟结节性硬 化的脑皮质结构异常、室管膜下结节、癫痫发作及智能障碍，但尚未发现 模拟除神经系统以外的脏器损害。(2)随着照射剂量的增加，脑组织的损 害程度逐渐加重，智能障碍明显，但脑痫性放电并未增加。(3)该模型制 作简单，死亡率低，成功率高、易于操作，为进一步研究其发病机制和致 痫机制提供可靠的保障。 关键词：结节性硬化，皮质发育畸形，局灶性皮质发育畸形，病理学，错 构瘤，动物模型 万方数据 四川医科大学硕士学位论文The 四川医科大学硕士学位论文 The characteristics of the tuberous scler