非mhc基因调节免疫性心肌炎的机制内科学心血管专业论文.docxVIP

0．2，摘要0．2 0．2，摘要 0．2 摘要 中文摘要 非MHC基因调节免疫性心肌炎的机制 病毒性心肌炎好发于青少年儿童，大多数可以自愈或治疗后完全恢复，不留后遗症。但也 有一部分人容易反复患心肌炎或心肌炎的预后不良，迁延反复，最后形成慢性心肌炎，甚 至扩张型心肌病、心力衰竭。病毒性心肌炎的常见病原体是柯萨奇病毒，尤其以B3最为 常见。本实验室长期从事病毒性心肌炎的发病机制研究，用柯萨奇病毒B3病毒腹腔注射 可以在Balb／ctJ、鼠上诱导出急、慢性病毒性心肌炎甚至扩张型心肌病。病毒性心肌炎是 以CD4+T细胞为主介导的免疫炎症性疾病。发病共分为三个阶段，第一阶段是病毒损伤 心肌细胞，第二阶段是病毒入侵引起的免疫细胞浸润心肌组织诱发的免疫反应，第三阶段 是诱发自身免疫反应。所以为研究心肌炎的免疫学机制，我们使用了在无病毒条件下，用 小鼠心脏肌球蛋白诱导的自身免疫性心肌炎小鼠模型。这一模型模拟了病毒性心肌炎发病 的第三阶段。 通过自身免疫性心肌炎小鼠模型，大量的研究表明心肌炎和各类免疫细胞密切相关。 急性心肌炎时，CD4+T细胞、CD8+T细胞、树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞、自 然杀伤细胞等均在心肌组织中或增多。用CD4一／一敲基因小鼠或用CD4+抗体拮抗CD4+ T细胞后，小鼠不能诱导出心肌炎，并且过继转移CD4+T细胞到正常小鼠可以诱导出 心肌炎，所以CD4+T细胞在心肌炎的免疫机制中至关重要。初始的CD4+T细胞在不 同的细胞因子微环境里可以分化为不同的亚型，在IL一12的作用下分化为Thl，转录因子 是T—bet，转录蛋白是STAT4；在IL．4的作用下，分化为Th2细胞，转录因子是GATA3， 转录蛋白是STAT6；在TGF．臼的作用下，分化为T调节细胞，转录因子是Foxp3，转 录蛋白是STAT5；在TGF．口、IL一6、IL一21、IL一23的作用下分化为Thl7细胞，转录因子 是RORTt和RORa，转录蛋白是STAT3。Thl细胞的主要作用是针对内源性病原体，Th2细 0．2．摘要 0．2．摘要 胞针对过敏反应，T调节细胞以免疫耐受和抑制免疫反应为主，Thl7细胞针对外源性病 原体，参与炎症免疫反应。已有报道IFN一，y对心肌炎有保护作用。而Thl7可以加重心肌炎 症，因为在IL一17敲基因小鼠上心肌炎的炎症减轻。 MHC基因对心肌炎很重要，最近发现非MHC基因对心肌炎的影响更大。因为 在A．SW和B10．S4,鼠间具有相同的MHC(H-2。)，但它们对心肌炎的易感性不一 样，A．SW小鼠的心肌炎炎症重于B10．Sd,鼠。所以，非MHC在心肌炎的易感性中起 了关键作用。非MHC基因调节心肌炎易感性的免疫机制目前尚未有报道。 本研究的目的在于阐述非MHC基因调节心肌炎易感性程度不一致的小鼠间CD4+T细 胞的变化和功能、Thl和Thl7细胞在小鼠间区别及Thl7细胞分化的机制包括树突状细胞 在Thl7细胞分化中的作用和细胞因子受体、转录因子对Thl7细胞分化的影响、Earnl基因 调节心肌炎易感性时IL-6受体对Thl7分化的影响。 我们的研究分以下四部分： 第一部分，分离小鼠心肌组织中肌球蛋白，制备免疫乳剂，诱导小鼠自身免疫性心肌 炎模型。 肌球蛋白从180只各种不同品系的小鼠心脏中逐步分离出来，用300微克的肌球蛋白和 含有5毫克／毫升的灭活的结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂(CFA)等量混合制成免疫乳剂皮 下注射给小鼠以诱导实验性自身免疫性心肌炎。A．SW的心肌组织比B10．S的心肌组织炎症 明显。心脏和体重比表明A．SW小鼠的心脏扩大而B10．S不明显。这两类小鼠虽然具有相同 的MHC背景(H一2s)，但对自身免疫性心肌炎的易感性不一样。这说明具有遗传因素的 非MHC基因在自身免疫性心肌炎中起决定性作用。 第二部分，分析自身免疫性心肌炎小鼠中免疫细胞的功能和数量变化，尤其 是Thl和Thl7细胞。 小鼠品系间免疫细胞组成的内在差异可能会影响免疫反应，从而影响自身免疫性 2 D．2．摘要 D．2．摘要 心肌炎的易感性。A．SWtb鼠的CD4+T细胞的百分比高于B10．S小鼠。相反，A．Sw小鼠 的CD8+T细胞的百分比低于B10．S小鼠。其他免疫细胞的百分比在两类小鼠间没有显著 差别，它们分别是CDl9+B细胞，CDllb+F4／80一单核细胞，F4／80+CDllb+巨噬细 胞，CDllc+树突状细胞，CD3一DX5+自然杀伤细胞(NK细胞)和CD3+DX5+自然杀 伤T细胞(NK T细胞)之间。免疫后，两类小鼠间表现出相似的脾细胞绝对数量动态变 化曲线，第0天后细胞总数开始上升，第7天时A．SW小鼠的脾细胞数略高于B10．S小鼠但没 有统计学差异，第14天时两组小鼠的细胞数量达到高峰，之后开始下降