二甲双胍预处理对抗小鼠急性缺血性脑损伤的作用研究药理学专业论文.docxVIP

浙江大学颐上学世论文 浙江大学颐上学世论文 致i!jj 致 谢 岁月如梭，转眼间两年半的硕士学习生涯即将结束，仿佛经历了一次人生的 蜕变，懂得了许多，也成长了许多。回首望去，那些忙碌、艰辛、感动、喜悦、 兴奋的时刻依然会那么清晰的浮现在眼前。 首先，特别感谢我的导师陈忠教授。从最初的阅读文献到设计实验，陈老师 带领我一步步走进科研之门。在一次次组会中，教导我如何分析实验结果、把握 课题的全局方向。最令我难忘的是在课题遇到瓶颈的时候，陈老师更是十分耐心 认真地引导、帮助我寻找突破口，鼓励支持我，让我重新找回自信，最终在陈老 师的带领下成功走出困境。在我心里，陈老师不仅是一位尊敬的长者，常常以您 自身的经历与丰富的阅历教导我们“做人做事做学问”的道理；您还是一位慈父，像 对待孩子一样关心我们的生活，宽容我们的缺点，让实验室成为我们第二个家。 衷心感谢张翔南老师对我一贯的耐心指导和帮助，教会我实验的点点滴滴。 感谢实验室张世红老师、胡薇薇老师、侯伟伟老师对我课题研究的支持与帮助。 感谢袁扬师兄教会我各项实验技能以及对我实验的帮助。感谢蒋磊师姐、沈哲师 兄、廖儒佳、祖筠筠、郑艳榕、吴晓丽、李彦昕等同学对我课题的帮助。感谢实 验室所有小伙伴们，正是因为你们的存在才让我们的大家庭更温暖，才让我的硕 士生活更丰富多彩。 最后，感谢我的父母、亲人、朋友，感谢你们一直以来对我的支持、关怀和 鼓励，你们永远是我最坚强的后盾。还有太多感谢的话语，虽然没有说，但我会 一直默默记在心底。谢谢大家! 万方数据 浙江人‘二颐士学位论文 浙江人‘二颐士学位论文 中文摘要 二甲双胍预处理对抗小鼠急性缺血性脑损伤 的作用研究 浙江大学药学院 药理学 硕士研究生 邓恬 导 师 陈忠教授 摘要 目的：长期服用二甲双胍可有效降低糖尿病患者的脑卒中发生率。然而，在脑缺 血急性损伤期，二甲双胍是否具有抗脑缺血损伤作用尚不清楚。本研究拟探讨二 甲双胍的抗急性缺血性脑损伤作用及其特征，并初步探索其作用机制。 方法：雄性C57BL 76小鼠进行永久性或短暂性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO；transient MCAO，tMCAO)手术建立脑缺血动物模 型。二甲双胍3，10，30 mg／kg／d分别于MCAO手术前1，3，7 d；或缺血即刻或再灌 即刻；或再灌后1，3，6 h腹腔注射给药。MCAO缺血或再灌后12 h，取右侧大脑 皮层组织检测细胞凋亡相关蛋白、AMPK、pAMPK的表达。MCAO缺血或再灌后 24 h检测脑梗死体积与神经症状评分。 结果：二甲双胍10 mg／kg／d预处理7 d-9模型组相比能显著减少pMCAO所致脑梗 死体积及神经症状评分，并有效抑制缺血诱导的细胞凋亡，表现为Bcl．2／Bax比值 的升高以及cleaved Caspase．3表达的下降。但二甲双胍其它剂量，3 mg／kg／d和30 mg／kg／d，则没有神经保护作用。当二甲双胍10 mg／kg／d的预处理时间缩短至3 d， 其保护作用也相应的下降；而当预处理时间缩短至l d或者在缺血即刻给药时，二 甲双胍的保护作用消失。在短暂性脑缺血tMCAO模型中，预处理二甲双胍对缺血 再灌诱导的脑组织损伤没有保护作用。并且，当再灌3 h后给予二甲双胍则进一步 II 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 加重缺血性脑损伤。此外，在缺血的脑组织中，二甲双胍10 mg／kg／d预处理7 d 后，AMPK-9 pAMPK的表达显著下调，而缩短预处理时间或改变二甲双胍的给 药剂量或在tMCAO模型中，AMPK与pAMPK表达下降的程度均不显著。AMPK 抑制剂Compound C能够协同增强二甲双胍的抗缺血性脑损伤作用。 结论：本研究发现在脑缺血损伤急性期，二甲双胍预处理是其产生神经保护作用 所必需的，10 mg／kg／d预处理7 d可显著减轻缺血性脑损伤；但二甲双胍对伴随血 流复灌的脑缺血损伤无保护作用。二甲双胍预处理下调AMPK可能与其保护作用 相关。 关键词：脑缺