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尿液脑脊液蛋白测定SOPUCFP临床意义.doc
1检测原理
在反应过程中,焦酚红与钥酸钠结合生成在470 nni处有最大吸光度的红色化合物。样本中的蛋白 与此化合物在酸溶液中反应,生成蓝紫色的化合物,在600 nm处吸光度最大。600 nm处的吸光度与 样木屮的蛋白浓度成止比。
焦酚红-钳酸盐+蛋白 PR-MO-Protein复合物(在600nm处吸收)
2标本采集与处理
1采血方法
脑脊液,随即尿或24h未加防腐剂的尿液。
2标本保存
标本在不加添加剂时存储于4 °C下,可至少在三天内保持稳定。
3注意事项
脑脊液标本应避免溶血。尿液标本检测前应充分混匀。
3试剂和设备
1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
1. 1试剂组成
试剂船1?5孔为溶于甲醇的焦酚红0. 20 mM,钳酸钠0. 35 mM,稳定剂和表面活性剂,液体;7?8 孔为NaOIIO. 5N,液体。
1.2试剂准备
直接使用。
1.3试剂保存
试剂2?8°C保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控殆。
3.3校准品
西门子校准品。
4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品?离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
3标本处理
以2500?3000i7min,离心6-10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8£保存。
4.4标本检测
4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。
4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行 样品检测。
4. 4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按口期放好,保存期为7天。
5校准程序
1校准品准备和储存
直接使用,2?8 °C保存。
2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。
3校准程序
主屏幕按 F5: PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-F2: SET-UP RUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名0 perator校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样 品架上,按F7: LOAD/RUN-F4: RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10?-70°C可保存到瓶身有效期,未开启2?8°C可保
存90d,开启后2?8°C可保存30d o
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。
3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
木法线性范围为6~250mg/dL,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀 释因子后再重新检测。
8生物参考区间
尿液:11. 9mg/dL 149. 1 mg/天
脑脊液:15 ~45mg/dL
9临床意义
测定脑脊液总蛋白主要用于检查血/脑屏障对血浆蛋白质的通透性增加或检查鞘内分泌免疫球 蛋白增加。脑脊液总蛋白升高常见于脑组织和脑脊髓膜疾患,如化脓性脑脊髓膜炎、结核性脑脊髓 膜炎、梅毒性屮枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、脑出血等。
尿液总蛋白升高常见于肾小球渗透性过高、肾小管重吸收不全和蛋白分泌异常等疾病,如肾功能 衰竭、肾病综合症、多发性骨髓瘤等。
10参考文献
11]西门子医学诊断产品(上海)有限公司尿液/脑脊液蛋白(UCFP)测定试剂说明书。
[2]叶应妩,王毓三,申子瑜?全国临床检验操作规程.第3版?南京:东南大学出版社,2006:
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